Toledo

A Toledo sejtvonal egy diffúz nagy B-sejtes limfóma (DLBCL) sejtvonal, amelyet eredetileg egy DLBCL-ben szenvedő beteg perifériás véréből állítottak elő; a betegnél később, nagy dózisú kemoterápia és csontvelő-átültetés után másodlagos agyi limfóma alakult ki. Ez a sejtvonal összetett kariotípust mutat, amelyben számos kromoszómális aberráció figyelhető meg, azonban nem rendelkezik a Burkitt-limfómához kapcsolódó tipikus transzlokációkkal.

A Toledo sejtvonal egyik egyedülálló jellemzője az immunglobulin (Ig) polipeptidlánc expressziójának hiánya, valamint az is, hogy nem rendelkezik kimutatható konstans (C) régió génszegmensekkel. Ennek ellenére a Toledo megőrzi azt a képességét, hogy változó (V) génszegmenseiben szomatikus hipermutáción menjen keresztül, ami egy olyan jelenség, amelyet jellemzően a germinális központ B-sejtjeiben figyelnek meg. Érdekes módon a Toledo jelentősebb klonális mutációk hiánya ellenére is nagyobb gyakorisággal halmoz fel intraklonális mutációkat, mint más limfóma-sejtvonalak, például a Daudi és a Raji. Ez arra utal, hogy a mutációs folyamat a transzformációt követően in vitro is folytatódhatott, ami potenciálisan értékes modellt jelenthet a szomatikus hipermutáció molekuláris mechanizmusainak tanulmányozásához.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban