SK-N-SH

A linhagem celular SK-N-SH é um modelo de neuroblastoma humano originalmente estabelecido a partir da aspiração da medula óssea de uma criança com neuroblastoma metastático. É amplamente utilizada na pesquisa sobre o câncer, particularmente para o estudo da diferenciação neuronal, da biologia do neuroblastoma e de intervenções terapêuticas. A linha celular se destaca por sua heterogeneidade e por sua capacidade de se diferenciar em fenótipos de tipo neuronal e não neuronal sob condições adequadas, o que imita de perto a diversidade celular observada em tumores de neuroblastoma.

A análise cromossômica da SK-N-SH revelou um cariótipo quase diploide com anomalias numéricas e estruturais. A linha apresenta consistentemente trissomia do cromossomo 7, juntamente com translocações envolvendo os cromossomos 9 e 17. Especificamente, um segmento do cromossomo 17 sofre translocação para o cromossomo 22, resultando em trissomia parcial do cromossomo 17. Apesar dessas alterações, as células SK-N-SH apresentam características cariotípicas relativamente estáveis em comparação com outros modelos de neuroblastoma, tornando-as adequadas para o estudo de aberrações cromossômicas no neuroblastoma.

Funcionalmente, as células SK-N-SH possuem propriedades neuronais e expressam marcadores de neuroblastoma, incluindo enzimas de síntese de neurotransmissores, o que é indicativo de sua origem na crista neural. É importante ressaltar que as células SK-N-SH podem ser induzidas a se diferenciar em células semelhantes a neurônios, com alterações morfológicas e bioquímicas. Agentes como o ácido retinóico são comumente usados para desencadear essa diferenciação, resultando no aumento do crescimento de neuritos e na expressão de marcadores neuronais. Essa propriedade torna as células SK-N-SH uma ferramenta valiosa para examinar vias de diferenciação neuronal, neurotoxicidade e alvos terapêuticos do neuroblastoma.

A SK-N-SH serve como um modelo robusto e versátil para investigar a progressão do neuroblastoma, a diferenciação neuronal e as respostas terapêuticas. Sua estabilidade cariotípica e capacidade de se diferenciar em fenótipos neuronais fornecem uma plataforma para pesquisas translacionais sobre cânceres pediátricos e desenvolvimento neuronal.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.