Přejít na obsah
SK-N-SH
Tkáň
Mozek
Nemoc
Neuroblastom
Místo metastázy
Kostní dřeň
Synonyma
SK N SH, SKN-SH, SK-NSH, SKNSH, NSH

Dokumenty

SK-N-SH

Cell line · Číslo výrobku 305028

The SK-N-SH cell line is a human neuroblastoma model originally established from the bone marrow aspirate of a child with metastatic neuroblastoma. It is ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie SK-N-SH je model lidského neuroblastomu původně vytvořený z aspirátu kostní dřeně dítěte s metastazujícím neuroblastomem. Je široce využívána ve výzkumu rakoviny, zejména pro studium diferenciace neuronů, biologie neuroblastomu a terapeutických zásahů. Tato buněčná linie je pozoruhodná svou heterogenitou a schopností diferencovat se za vhodných podmínek na neuronální a ne-neuronální fenotypy, což věrně napodobuje buněčnou rozmanitost pozorovanou v neuroblastomových nádorech.

Chromozomová analýza SK-N-SH odhalila téměř diploidní karyotyp s numerickými a strukturálními abnormalitami. Linie důsledně vykazuje trizomii chromozomu 7 spolu s translokacemi zahrnujícími chromozomy 9 a 17. Konkrétně se úsek chromozomu 17 translokuje na chromozom 22, což vede k částečné trizomii chromozomu 17. Navzdory těmto změnám vykazují buňky SK-N-SH ve srovnání s jinými modely neuroblastomu relativně stabilní karyotypové rysy, což je činí vhodnými pro studium chromozomálních aberací u neuroblastomu.

Z funkčního hlediska mají buňky SK-N-SH neuronální vlastnosti a exprimují neuroblastomové markery, včetně enzymů syntézy neurotransmiterů, což svědčí o jejich původu z nervového hřebene. Důležité je, že buňky SK-N-SH lze indukovat k diferenciaci na buňky podobné neuronům s morfologickými a biochemickými změnami. K vyvolání této diferenciace se běžně používají látky, jako je kyselina retinová, což vede ke zvýšenému růstu neuritů a expresi neuronálních markerů. Tato vlastnost činí z SK-N-SH cenný nástroj pro zkoumání cest neuronální diferenciace, neurotoxicity a terapeutických cílů neuroblastomu.

SK-N-SH slouží jako robustní a univerzální model pro zkoumání progrese neuroblastomu, neuronální diferenciace a terapeutických odpovědí. Jeho karyotypová stabilita a schopnost diferenciace do neuronálních fenotypů poskytují platformu pro translační výzkum dětských nádorů a vývoje neuronů.

Tkáň
Mozek
Nemoc
Neuroblastom
Místo metastázy
Kostní dřeň
Synonyma
  • SK N SH
  • SKN-SH
  • SK-NSH
  • SKNSH
  • NSH

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
SK-N-SH (katalogové číslo Cytion 305028)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0531

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Aktivátoru plazminogenu, vykazuje zvýšenou expresi M-Csf po léčbě peptidem amyloidu beta.
Exprese antigenu
Krevní skupina A, Rh+

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme 50% základní médium + 40% FBS + 10% DMSO nebo CM-1 (katalogové číslo Cytion 800100), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu vyvolaného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
4 roky
Etnická příslušnost
Evropská