Pāriet uz saturu
SK-N-SH
Audums
Smadzenes
Slimība
Neuroblastoma
Metastāžu vieta
Kaulu smadzenes
Sinonīmi
SK N SH, SKN-SH, SK-NSH, SKNSH, NSH

Dokumenti

SK-N-SH

Cell line · Preces numurs 305028

The SK-N-SH cell line is a human neuroblastoma model originally established from the bone marrow aspirate of a child with metastatic neuroblastoma. It is ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SK-N-SH šūnu līnija ir cilvēka neiroblastomas modelis, kas sākotnēji izveidots no bērna ar metastātisku neiroblastomu kaulu smadzeņu aspirāta. To plaši izmanto vēža pētījumos, jo īpaši neironu diferenciācijas, neiroblastomas bioloģijas un terapeitiskās iejaukšanās izpētē. Šūnu līnija izceļas ar savu heterogenitāti un spēju piemērotos apstākļos diferencēties neironiem līdzīgos un neironiem nepiederošos fenotipos, kas precīzi atdarina neiroblastomas audzējos novēroto šūnu daudzveidību.

SK-N-SH hromosomu analīze atklāja gandrīz diploidālu kariotipu ar skaitliskajām un strukturālajām anomālijām. Šai līnijai konsekventi konstatēta 7. hromosomas trisomija, kā arī 9. un 17. hromosomas translokācijas. Konkrēti, 17. hromosomas segments pārvietots uz 22. hromosomu, kā rezultātā rodas daļēja 17. hromosomas trisomija. Neraugoties uz šīm izmaiņām, SK-N-SH šūnām salīdzinājumā ar citiem neiroblastomas modeļiem ir salīdzinoši stabilas kariotipiskās iezīmes, tāpēc tās ir piemērotas neiroblastomas hromosomu aberāciju izpētei.

Funkcionāli SK-N-SH šūnām piemīt neironu īpašības un tās ekspresē neiroblastomas marķierus, tostarp neirotransmiteru sintēzes enzīmus, kas norāda uz to nervu kores izcelsmi. Svarīgi, ka SK-N-SH šūnas var inducēt diferencēties par neironiem līdzīgām šūnām ar morfoloģiskām un bioķīmiskām izmaiņām. Šādas diferenciācijas ierosināšanai parasti izmanto tādus līdzekļus kā retinoīnskābe, kas izraisa pastiprinātu neirītu augšanu un neironu marķieru ekspresiju. Šī īpašība padara SK-N-SH par vērtīgu līdzekli neironu diferenciācijas ceļu, neirotoksicitātes un neiroblastomas terapeitisko mērķu izpētei.

SK-N-SH kalpo kā spēcīgs un daudzpusīgs modelis neiroblastomas progresēšanas, neironu diferenciācijas un terapeitiskās atbildes reakcijas izpētei. Tās kariotipiskā stabilitāte un spēja diferencēties uz neironu fenotipiem nodrošina platformu bērnu vēža un neironu attīstības pētījumiem.

Audums
Smadzenes
Slimība
Neuroblastoma
Metastāžu vieta
Kaulu smadzenes
Sinonīmi
  • SK N SH
  • SKN-SH
  • SK-NSH
  • SKNSH
  • NSH

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
SK-N-SH (Cytion kataloga numurs 305028)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0531

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Plazminogēna aktivators, liecina par palielinātu M-Csf ekspresiju pēc apstrādes ar amiloīda beta peptīdu.
Antigēna ekspresija
A asinsgrupa, Rh+

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam 50 % bāzes barotni + 40 % FBS + 10 % DMSO vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu reģenerāciju un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
4 gadi
Etniskā piederība
Eiropas