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SK-N-SH
Tecido
Cérebro
Doença
Neuroblastoma
Local da metástase
Medula óssea
Sinónimos
SK N SH, SKN-SH, SK-NSH, SKNSH, NSH

Documentos

SK-N-SH

Cell line · Número do produto 305028

The SK-N-SH cell line is a human neuroblastoma model originally established from the bone marrow aspirate of a child with metastatic neuroblastoma. It is ...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular SK-N-SH é um modelo de neuroblastoma humano originalmente estabelecido a partir do aspirado da medula óssea de uma criança com neuroblastoma metastático. É amplamente utilizada na investigação do cancro, nomeadamente para estudar a diferenciação neuronal, a biologia do neuroblastoma e as intervenções terapêuticas. A linha celular é notável pela sua heterogeneidade e pela sua capacidade de se diferenciar em fenótipos do tipo neuronal e não neuronal em condições adequadas, o que imita de perto a diversidade celular observada nos tumores de neuroblastoma.

A análise cromossómica da SK-N-SH revelou um cariótipo quase diploide com anomalias numéricas e estruturais. A linha apresenta consistentemente trissomia do cromossoma 7, juntamente com translocações envolvendo os cromossomas 9 e 17. Especificamente, um segmento do cromossoma 17 transloca-se para o cromossoma 22, resultando numa trissomia parcial do cromossoma 17. Apesar destas alterações, as células SK-N-SH apresentam caraterísticas cariotípicas relativamente estáveis em comparação com outros modelos de neuroblastoma, o que as torna adequadas para o estudo de aberrações cromossómicas no neuroblastoma.

Funcionalmente, as células SK-N-SH possuem propriedades neuronais e expressam marcadores de neuroblastoma, incluindo enzimas de síntese de neurotransmissores, que são indicativos da sua origem na crista neural. É importante notar que as células SK-N-SH podem ser induzidas a diferenciar-se em células semelhantes a neurónios com alterações morfológicas e bioquímicas. Agentes como o ácido retinóico são normalmente utilizados para desencadear esta diferenciação, resultando num aumento do crescimento de neurites e na expressão de marcadores neuronais. Esta propriedade faz da SK-N-SH uma ferramenta valiosa para examinar as vias de diferenciação neuronal, a neurotoxicidade e os alvos terapêuticos do neuroblastoma.

O SK-N-SH serve como um modelo robusto e versátil para investigar a progressão do neuroblastoma, a diferenciação neuronal e as respostas terapêuticas. A sua estabilidade cariotípica e a capacidade de se diferenciar em fenótipos neuronais proporcionam uma plataforma para a investigação translacional sobre cancros pediátricos e desenvolvimento neuronal.

Tecido
Cérebro
Doença
Neuroblastoma
Local da metástase
Medula óssea
Sinónimos
  • SK N SH
  • SKN-SH
  • SK-NSH
  • SKNSH
  • NSH

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
SK-N-SH (número de catálogo da Cytion 305028)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0531

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Plasminogen Activator, mostra um aumento da expressão de M-Csf após tratamento com o péptido beta-amiloide.
Expressão do antígeno
Tipo de sangue A, Rh+

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos 50% de meio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
4 anos
Etnia
Europeu