Mine otse sisu juurde
SK-N-SH
Kude
Aju
Haigus
Neuroblastoom
Metastaaside asukoht
Luuüdi
Sünonüümid
SK N SH, SKN-SH, SK-NSH, SKNSH, NSH

Dokumendid

SK-N-SH

Cell line · Toote number 305028

The SK-N-SH cell line is a human neuroblastoma model originally established from the bone marrow aspirate of a child with metastatic neuroblastoma. It is ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SK-N-SH rakuliin on inimese neuroblastoomi mudel, mis on algselt loodud metastaatilist neuroblastoomi põdeva lapse luuüdi aspiratsioonist. Seda kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes, eelkõige neuronaalse diferentseerumise, neuroblastoomi bioloogia ja terapeutiliste sekkumiste uurimiseks. Rakuliin on märkimisväärne oma heterogeensuse ja võime poolest diferentseeruda neuronaalseks ja mitte-neuronaalseks fenotüübiks asjakohastes tingimustes, mis jäljendab lähedalt neuroblastoomi kasvajates täheldatud rakkude mitmekesisust.

SK-N-SH kromosoomianalüüs näitas peaaegu diploidset karüotüüpi koos numbriliste ja struktuuriliste kõrvalekalletega. Liinil on järjekindlalt kromosoomi 7 trisoomia koos kromosoomide 9 ja 17 translokatsioonidega. Täpsemalt, kromosoomi 17 lõik translokseerub kromosoomile 22, mille tulemuseks on kromosoomi 17 osaline trisoomia. Vaatamata nendele muutustele on SK-N-SH rakkudel võrreldes teiste neuroblastoomi mudelitega suhteliselt stabiilsed karyotüübid, mistõttu sobivad need rakud neuroblastoomi kromosoomaberratsioonide uurimiseks.

Funktsionaalselt omavad SK-N-SH rakud neuronaalseid omadusi ja ekspresseerivad neuroblastoomi markereid, sealhulgas neurotransmitterite sünteesi ensüüme, mis viitavad nende neuraalrakkude päritolule. Oluline on see, et SK-N-SH rakke saab diferentseerida neuronilaadseks rakuks koos morfoloogiliste ja biokeemiliste muutustega. Sellise diferentseerumise käivitamiseks kasutatakse tavaliselt selliseid aineid nagu retinoiinhape, mille tulemusel suureneb neuriitide väljareng ja neuronaalsete markerite ekspressioon. See omadus muudab SK-N-SH väärtuslikuks vahendiks neuronaalse diferentseerumise radade, neurotoksilisuse ja neuroblastoomi terapeutiliste sihtmärkide uurimiseks.

SK-N-SH on tugev ja mitmekülgne mudel neuroblastoomi progresseerumise, neuronaalse diferentseerumise ja ravivastuste uurimiseks. Selle karyotüüpiline stabiilsus ja võime diferentseeruda neuronaalseks fenotüübiks pakuvad platvormi lastevähi ja neuronaalse arengu translatiivseteks uuringuteks.

Kude
Aju
Haigus
Neuroblastoom
Metastaaside asukoht
Luuüdi
Sünonüümid
  • SK N SH
  • SKN-SH
  • SK-NSH
  • SKNSH
  • NSH

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
SK-N-SH (Cytioni katalooginumber 305028)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0531

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Plasminogeeni aktivaator, näitab M-Csf-i suurenenud ekspressiooni pärast ravi amüloid-Beta-peptiidiga.
Antigeeni ekspressioon
Veregrupp A, Rh+

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüokonserveerimissöötmena kasutame 50% põhikeskkonda + 40% FBS + 10% DMSO ehk CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
4 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa