Pereiti prie turinio
SK-N-SH
Audinys
Smegenys
Liga
Neuroblastoma
Metastazių vieta
Kaulų čiulpai
Sinonimai
SK N SH, SKN-SH, SK-NSH, SKNSH, NSH

Dokumentai

SK-N-SH

Cell line · Prekės numeris 305028

The SK-N-SH cell line is a human neuroblastoma model originally established from the bone marrow aspirate of a child with metastatic neuroblastoma. It is ...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

SK-N-SH ląstelių linija yra žmogaus neuroblastomos modelis, iš pradžių sukurtas iš vaiko, sergančio metastazavusia neuroblastoma, kaulų čiulpų aspirato. Ji plačiai naudojama vėžio tyrimams, ypač neuronų diferenciacijai, neuroblastomos biologijai ir terapinėms intervencijoms tirti. Ši ląstelių linija išsiskiria heterogeniškumu ir gebėjimu atitinkamomis sąlygomis diferencijuotis į neuronų ir ne neuronų fenotipus, o tai labai tiksliai atkartoja neuroblastomos navikuose stebimą ląstelių įvairovę.

SK-N-SH chromosomų analizė atskleidė beveik diploidinį kariotipą su skaitmeninėmis ir struktūrinėmis anomalijomis. Šioje linijoje nuolat pastebima 7 chromosomos trisomija ir 9 bei 17 chromosomų translokacijos. Konkrečiai 17 chromosomos segmentas perkeliamas į 22 chromosomą, todėl atsiranda dalinė 17 chromosomos trisomija. Nepaisant šių pakitimų, SK-N-SH ląstelės pasižymi palyginti stabiliomis kariotipinėmis savybėmis, palyginti su kitais neuroblastomos modeliais, todėl yra tinkamos neuroblastomos chromosomų aberacijoms tirti.

Funkciniu požiūriu SK-N-SH ląstelės pasižymi neuronų savybėmis ir ekspresuoja neuroblastomos žymenis, įskaitant neuromediatorių sintezės fermentus, kurie rodo jų nervų keteros kilmę. Svarbu tai, kad SK-N-SH ląstelės gali būti paskatintos diferencijuotis į į neuronus panašias ląsteles su morfologiniais ir biocheminiais pokyčiais. Šiai diferenciacijai paskatinti paprastai naudojamos tokios medžiagos kaip retinoinė rūgštis, todėl padidėja neuritų augimas ir neuronų žymenų raiška. Dėl šios savybės SK-N-SH yra vertingas įrankis tiriant neuronų diferenciacijos kelius, neurotoksiškumą ir neuroblastomos gydymo tikslus.

SK-N-SH yra patikimas ir universalus modelis neuroblastomos progresavimui, neuronų diferenciacijai ir terapiniam atsakui tirti. Jo kariotipinis stabilumas ir gebėjimas diferencijuotis į neuronų fenotipus suteikia galimybę atlikti vaikų vėžio ir neuronų vystymosi tyrimus.

Audinys
Smegenys
Liga
Neuroblastoma
Metastazių vieta
Kaulų čiulpai
Sinonimai
  • SK N SH
  • SKN-SH
  • SK-NSH
  • SKNSH
  • NSH

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis

04Identifikatoriai

Nuoroda
SK-N-SH (Cytion katalogo numeris 305028)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0531

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Plazminogeno aktyvatorius, rodo padidėjusią M-Csf ekspresiją po gydymo amiloido beta peptidu.
Antigeno ekspresija
A kraujo grupė, Rh+

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame 50 % bazinę terpę + 40 % FBS + 10 % DMSO arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
4 metai
Etninė priklausomybė
Europos