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SK-N-SH
Tessuto
Cervello
Malattia
Neuroblastoma
Sito metastatico
Midollo osseo
Sinonimi
SK N SH, SKN-SH, SK-NSH, SKNSH, NSH

Documenti

SK-N-SH

Cell line · Codice prodotto 305028

The SK-N-SH cell line is a human neuroblastoma model originally established from the bone marrow aspirate of a child with metastatic neuroblastoma. It is ...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare SK-N-SH è un modello di neuroblastoma umano originariamente ricavato dall'aspirato midollare di un bambino affetto da neuroblastoma metastatico. È ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro, in particolare per studiare la differenziazione neuronale, la biologia del neuroblastoma e gli interventi terapeutici. Questa linea cellulare si distingue per la sua eterogeneità e per la capacità di differenziarsi in fenotipi neuronali e non neuronali in condizioni appropriate, che imitano da vicino la diversità cellulare osservata nei tumori del neuroblastoma.

L'analisi cromosomica di SK-N-SH ha rivelato un cariotipo quasi diploide con anomalie numeriche e strutturali. La linea mostra costantemente una trisomia del cromosoma 7, insieme a traslocazioni che coinvolgono i cromosomi 9 e 17. In particolare, un segmento del cromosoma 17 trasloca sul cromosoma 22, dando luogo a una trisomia parziale del cromosoma 17. Nonostante queste alterazioni, le cellule SK-N-SH presentano caratteristiche cariotipiche relativamente stabili rispetto ad altri modelli di neuroblastoma, rendendole adatte allo studio delle aberrazioni cromosomiche nel neuroblastoma.

Dal punto di vista funzionale, le cellule SK-N-SH possiedono proprietà neuronali ed esprimono marcatori di neuroblastoma, compresi gli enzimi di sintesi dei neurotrasmettitori, che sono indicativi della loro origine dalla cresta neurale. È importante notare che le cellule SK-N-SH possono essere indotte a differenziarsi in cellule simili ai neuroni con cambiamenti morfologici e biochimici. Agenti come l'acido retinoico sono comunemente usati per innescare questa differenziazione, con conseguente aumento della crescita dei neuriti e dell'espressione di marcatori neuronali. Questa proprietà rende SK-N-SH uno strumento prezioso per esaminare le vie di differenziazione neuronale, la neurotossicità e gli obiettivi terapeutici del neuroblastoma.

SK-N-SH è un modello robusto e versatile per studiare la progressione del neuroblastoma, la differenziazione neuronale e le risposte terapeutiche. La sua stabilità cariotipica e la capacità di differenziarsi in fenotipi neuronali forniscono una piattaforma per la ricerca traslazionale sui tumori pediatrici e sullo sviluppo neuronale.

Tessuto
Cervello
Malattia
Neuroblastoma
Sito metastatico
Midollo osseo
Sinonimi
  • SK N SH
  • SKN-SH
  • SK-NSH
  • SKNSH
  • NSH

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SK-N-SH (numero di catalogo Cytion 305028)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0531

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
L'attivatore del plasminogeno mostra un'aumentata espressione di M-Csf dopo il trattamento con il peptide amiloide-beta.
Espressione dell'antigene
Gruppo sanguigno A, Rh+

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo 50% di terreno basale + 40% di FBS + 10% di DMSO, o CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crioindotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
4 anni
Etnia
Europeo