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3T3-L1
Tissu
Embryonnaire
Site métastatique
Sans objet (préadipocytes embryonnaires ; non tumorigènes)
Synonymes
3T3 L1, 3T3L1, 3T3-L1 ad, NIH-3T3-L1, NIH3T3-L1

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3T3-L1

Cell line · Référence du produit 400107

3T3-L1 cells are a clonal line of preadipocytes derived from mouse embryonic fibroblasts. These cells have become a widely used in vitro model for studyin...

€430.00hors taxes et frais de port
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Recommandé (lot le plus récent)
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1

01Informations générales

Description

les cellules 3T3-L1 sont une lignée clonale de préadipocytes dérivés de fibroblastes embryonnaires de souris. Ces cellules sont devenues un modèle in vitro largement utilisé pour étudier le processus d'adipogenèse, y compris l'adipogenèse et la lipogenèse, qui est la différenciation des préadipocytes en adipocytes (cellules adipeuses). Le nom "3T3" fait référence au protocole de transfert (T) qui consistait à transférer les cellules tous les trois jours, et "L1" désigne le clone particulier qui a été isolé.

Au départ, les cellules 3T3-L1 présentent une morphologie semblable à celle des fibroblastes, mais après induction de la différenciation des cellules 3T3-L1, celles-ci passent d'un état préadipocytaire à un état adipocytaire mature et accumulent des gouttelettes de lipides, une caractéristique de l'obésité et du syndrome métabolique. Le processus de différenciation des préadipocytes 3T3-L1 en adipocytes 3T3-L1 est déclenché par un cocktail spécifique d'inducteurs, comprenant généralement la dexaméthasone, la 3-isobutyl-1-méthylxanthine (IBMX) et l'insuline.

Lorsque les adipocytes 3T3-L1 adoptent les caractéristiques des adipocytes matures, ils commencent à exprimer des gènes cruciaux pour la fonction adipocytaire, tels que ceux codant pour les enzymes impliquées dans le métabolisme des acides gras et les hormones comme la leptine et l'adiponectine, qui jouent un rôle vital dans la régulation de l'appétit, de l'équilibre énergétique et de la sensibilité à l'insuline. L'étude des transformations des cellules 3T3-L1 améliore notre compréhension de l'adipogenèse, de l'obésité et des maladies liées à la graisse, telles que le diabète de type 2, en révélant comment l'accumulation de lipides dans les adipocytes conduit à un dysfonctionnement cellulaire et à des problèmes métaboliques plus larges.

En outre, la lignée cellulaire 3T3-L1 permet d'étudier l'impact de diverses substances sur le comportement des adipocytes, comme l'effet d'agents pharmacologiques sur la lipolyse ou les propriétés anti-inflammatoires de certains régimes alimentaires susceptibles de prévenir la résistance à l'insuline.

les cellules 3T3-L1 ont été largement utilisées pour étudier les mécanismes moléculaires et cellulaires qui sous-tendent la différenciation des adipocytes, la sensibilité à l'insuline, le métabolisme des lipides et les effets de divers agents nutritionnels et pharmacologiques sur ces processus. Compte tenu de leur capacité à se différencier en adipocytes et de leur facilité de culture in vitro, les cellules 3T3-L1 constituent un système modèle précieux pour la recherche sur l'obésité et le diabète, ainsi que pour la découverte de nouvelles cibles thérapeutiques liées aux maladies métaboliques

Tissu
Embryonnaire
Site métastatique
Sans objet (préadipocytes embryonnaires ; non tumorigènes)
Applications
les cellules 3T3-L1 ont été utilisées comme système modèle pour comprendre les mécanismes moléculaires qui régulent l'adipogenèse et le métabolisme des lipides, et ont été utilisées dans la recherche liée à l'obésité, au diabète et aux maladies métaboliques. Elles constituent également un hôte de transfection viable.
Synonymes
  • 3T3 L1
  • 3T3L1
  • 3T3-L1 ad
  • NIH-3T3-L1
  • NIH3T3-L1

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
Sans OGM
Informations détaillées sur le statut OGM
No genetic modification; 3T3-L1 is a subclone of the NIH/3T3 line selected for adipogenic differentiation potential; no introduced transgene
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type fibroblastique
Type de cellule
Préadipocyte / adipocyte (après différenciation)
Tumorigène
Non
Statut de ploïdie
Aneuploïde
Caryotype
2n=40

04Identifiants

Référence
3T3-L1 (numéro de catalogue Cytion 400107)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0123

05Expression et sensibilité

Sensibilité aux virus
Virus de la leucémie murine, virus du sarcome murin, stomatite vésiculaire, vaccine, herpès simplex, oncornavirus N-tropiques C
Produits
Insuline, collagène, triglycérides

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Rapport de fractionnement
1 à 5
Densité de semis
1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
Renouvellement des fluides
Tous les 2 ou 3 jours
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
Suisse albinos
Âge du donneur
Embryon