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3T3-L1
Tissue
胚胎期的
Metastatic site
不適用(胚胎期前脂肪細胞;無致瘤性)
Synonyms
3T3 L1, 3T3L1, 3T3-L1 ad, NIH-3T3-L1, NIH3T3-L1

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3T3-L1

Cell line · Product number 400107

3T3-L1 cells are a clonal line of preadipocytes derived from mouse embryonic fibroblasts. These cells have become a widely used in vitro model for studyin...

US$395.00excl. tax and shipping
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  • CoA
1

01General information

Description

3T3-L1 細胞是一種源自小鼠胚胎成纖維細胞的預脂肪細胞克隆系。這些細胞已成為研究脂肪生成過程(包括脂肪生成與脂質合成)的廣泛應用之體外模型,其中脂肪生成即指預脂肪細胞分化為脂肪細胞(脂肪組織細胞)的過程。 名稱「3T3」源自「轉移(T)」培養方案,即每 3 天進行一次細胞轉移;而「L1」則代表所分離出的特定克隆。

最初,3T3-L1 細胞呈現纖維母細胞般的形態,但在誘導 3T3-L1 細胞分化後,這些細胞會從前脂肪細胞轉變為成熟脂肪細胞,並積聚脂滴——這是肥胖症與代謝症候群的標誌性特徵。 3T3-L1 前脂肪細胞向 3T3-L1 脂肪細胞的分化過程,是由一種特定的誘導劑混合物觸發的,通常包括地塞米松、3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(IBMX)和胰島素。

隨著 3T3-L1 脂肪細胞逐漸呈現成熟脂肪細胞的特徵,它們開始表達對脂肪細胞功能至關重要的基因,例如編碼參與脂肪酸代謝的酶,以及瘦素和脂聯素等激素的基因;這些激素在調節食慾、能量平衡和胰島素敏感性方面發揮著關鍵作用。 透過研究 3T3-L1 細胞的轉化過程,能揭示脂肪細胞內脂質積聚如何導致細胞功能失調及更廣泛的代謝問題,從而加深我們對脂肪生成、肥胖以及與脂肪相關疾病(如第二型糖尿病)的理解。

此外,3T3-L1 細胞系對於探究各種物質對脂肪細胞行為的影響至關重要,例如藥理學製劑對脂肪分解的作用,或是某些飲食可能具有的抗發炎特性,這些特性或可預防胰島素抵抗。

3T3-L1 細胞已被廣泛用於研究脂肪細胞分化、胰島素敏感性、脂質代謝,以及各種營養和藥理學因子對這些過程的影響所涉及的分子與細胞機制。 鑑於其能分化為脂肪細胞且體外培養簡便,3T3-L1 細胞為肥胖與糖尿病研究,以及發現與代謝疾病相關的新治療靶點,提供了一個極具價值的模型系統。

Tissue
胚胎期的
Metastatic site
不適用(胚胎期前脂肪細胞;無致瘤性)
Applications
3T3-L1 細胞已被用作理解調節脂肪生成與脂質代謝之分子機制的模型系統,並廣泛應用於肥胖、糖尿病及代謝性疾病相關的研究中。此外,該細胞系亦是適用的轉染宿主。
Synonyms
  • 3T3 L1
  • 3T3L1
  • 3T3-L1 ad
  • NIH-3T3-L1
  • NIH3T3-L1

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; 3T3-L1 is a subclone of the NIH/3T3 line selected for adipogenic differentiation potential; no introduced transgene
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
成纖維細胞樣
Cell type
前脂肪細胞/脂肪細胞(分化後)
Tumourigenic
不
Ploidy status
非整倍體
Karyotype
2n=40

04Identifiers

Citation
3T3-L1(Cytion 型號 400107)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0123

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
小鼠白血病病毒、小鼠肉瘤病毒、水疱性口炎病毒、牛痘病毒、單純疱疹病毒、N-嗜性腫瘤病毒 C 型
Products
胰島素、膠原蛋白、三酸甘油酯

06Handling and culture

Culture medium
DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Split ratio
1 至 5
Seeding density
1 至 3 × 10⁴ 個細胞/cm²
Fluid renewal
每 2 至 3 天
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Breed / subspecies
瑞士白化病患者
Donor age
胚胎