Przejdź do treści
3T3-L1
Chusteczka
Embrionalny
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (embrionalne preadipocyty; nie wywołujące nowotworów)
Synonimy
3T3 L1, 3T3L1, 3T3-L1 ad, NIH-3T3-L1, NIH3T3-L1

Dokumenty

3T3-L1

Cell line · Numer produktu 400107

3T3-L1 cells are a clonal line of preadipocytes derived from mouse embryonic fibroblasts. These cells have become a widely used in vitro model for studyin...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

komórki 3T3-L1 są klonalną linią preadipocytów pochodzących z mysich fibroblastów embrionalnych. Komórki te stały się szeroko stosowanym modelem in vitro do badania procesu adipogenezy, w tym adipogenezy i lipogenezy, czyli różnicowania preadipocytów w adipocyty (komórki tłuszczowe). Nazwa "3T3" odnosi się do protokołu transferu (T), który obejmował przenoszenie komórek co 3 dni, a "L1" oznacza konkretny klon, który został wyizolowany.

Początkowo komórki 3T3-L1 wykazują morfologię podobną do fibroblastów, ale po indukcji różnicowania komórek 3T3-L1 zmieniają się z preadipocytów w dojrzałe adipocyty i gromadzą kropelki lipidów, co jest cechą charakterystyczną otyłości i zespołu metabolicznego. Proces różnicowania z preadipocytów 3T3-L1 do adipocytów 3T3-L1 jest wyzwalany przez specyficzny koktajl czynników indukujących, zwykle obejmujący deksametazon, 3-izobutylo-1-metyloksantynę (IBMX) i insulinę.

Gdy adipocyty 3T3-L1 przyjmują cechy dojrzałych adipocytów, zaczynają wyrażać geny kluczowe dla funkcji adipocytów, takie jak te kodujące enzymy zaangażowane w metabolizm kwasów tłuszczowych i hormony, takie jak leptyna i adiponektyna, które odgrywają istotną rolę w regulacji apetytu, bilansu energetycznego i wrażliwości na insulinę. Badanie transformacji komórek 3T3-L1 zwiększa nasze zrozumienie adipogenezy i otyłości oraz chorób związanych z tłuszczami, takich jak cukrzyca typu 2, poprzez ujawnienie, w jaki sposób akumulacja lipidów w adipocytach prowadzi do dysfunkcji komórkowej i szerszych problemów metabolicznych.

Co więcej, linia komórkowa 3T3-L1 odgrywa kluczową rolę w badaniu wpływu różnych substancji na zachowanie adipocytów, takich jak wpływ środków farmakologicznych na lipolizę lub właściwości przeciwzapalne niektórych diet, które mogą zapobiegać insulinooporności.

komórki 3T3-L1 były szeroko wykorzystywane do badania mechanizmów molekularnych i komórkowych leżących u podstaw różnicowania adipocytów, wrażliwości na insulinę, metabolizmu lipidów oraz wpływu różnych czynników żywieniowych i farmakologicznych na te procesy. Biorąc pod uwagę ich zdolność do różnicowania się w adipocyty i łatwość hodowli in vitro, komórki 3T3-L1 stanowią cenny system modelowy do badań nad otyłością i cukrzycą, a także do odkrywania nowych celów terapeutycznych związanych z chorobami metabolicznymi

Chusteczka
Embrionalny
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (embrionalne preadipocyty; nie wywołujące nowotworów)
Zastosowania
komórki 3T3-L1 zostały wykorzystane jako system modelowy do zrozumienia mechanizmów molekularnych regulujących adipogenezę i metabolizm lipidów, a także zostały wykorzystane w badaniach związanych z otyłością, cukrzycą i chorobami metabolicznymi. Są one również żywym gospodarzem transfekcji.
Synonimy
  • 3T3 L1
  • 3T3L1
  • 3T3-L1 ad
  • NIH-3T3-L1
  • NIH3T3-L1

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
Bez GMO
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
No genetic modification; 3T3-L1 is a subclone of the NIH/3T3 line selected for adipogenic differentiation potential; no introduced transgene
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Typ komórki
Preadipocyt / adipocyt (po różnicowaniu)
Nowotworotwórczy
Nie
Status ploidii
Aneuploid
Karyotyp
2n=40

04Identyfikatory

Źródło
3T3-L1 (numer katalogowy Cytion 400107)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0123

05Ekspresja i podatność

Podatność na wirusy
Wirus białaczki mysiej, wirus mięsaka mysiego, pęcherzykowe zapalenie jamy ustnej, krowianka, wirus opryszczki pospolitej, N-tropowe onkornawirusy C
Produkty
Insulina, kolagen, trójglicerydy

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 5
Gęstość wysiewu
od 1 do 3 × 10⁴ komórek/cm²
Odnawianie płynów
Co 2 do 3 dni
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
Szwajcarski albinos
Wiek dawcy
Zarodek