3T3-L1

3T3-L1-celler er en klonal linje af præadipocytter, der stammer fra embryonale fibroblaster fra mus. Disse celler er blevet en meget anvendt in vitro-model til undersøgelse af adipogeneseprocessen, herunder adipogenese og lipogenese, som er differentieringen af præadipocytter til adipocytter (fedtceller). Navnet "3T3" henviser til overførselsprotokollen (T), der involverede overførsel af cellerne hver 3. dag, og "L1" betegner den særlige klon, der blev isoleret.

Oprindeligt udviser 3T3-L1-celler en fibroblastlignende morfologi, men ved induktion af 3T3-L1-celledifferentiering skifter 3T3-L1-celler fra en præadipocyt til en moden adipocyttilstand og akkumulerer lipiddråber, et kendetegn for fedme og metabolisk syndrom. Differentieringsprocessen fra 3T3-L1 præadipocytter til 3T3-L1 adipocytter udløses af en specifik cocktail af induktorer, som typisk omfatter dexamethason, 3-isobutyl-1-methylxanthin (IBMX) og insulin.

Efterhånden som 3T3-L1 adipocytter får karakter af modne adipocytter, begynder de at udtrykke gener, der er afgørende for adipocytfunktionen, f.eks. dem, der koder for enzymer involveret i fedtsyremetabolismen og hormoner som leptin og adiponektin, som spiller en afgørende rolle i reguleringen af appetit, energibalance og insulinfølsomhed. Studiet af 3T3-L1-celletransformationer øger vores forståelse af adipogenese og fedme og fedtrelaterede sygdomme som type 2-diabetes ved at afsløre, hvordan lipidakkumulering i adipocytter fører til cellulær dysfunktion og bredere metaboliske problemer.

Desuden er 3T3-L1-cellelinjen medvirkende til at undersøge forskellige stoffers indvirkning på adipocytternes adfærd, f.eks. farmakologiske midlers effekt på lipolysen eller de antiinflammatoriske egenskaber ved visse diæter, der kan forebygge insulinresistens.

3T3-L1-celler er i vid udstrækning blevet brugt til at undersøge de molekylære og cellulære mekanismer, der ligger til grund for adipocytdifferentiering, insulinfølsomhed, lipidmetabolisme og virkningerne af forskellige ernæringsmæssige og farmakologiske midler på disse processer. På grund af deres evne til at differentiere sig til adipocytter og deres lette dyrkning in vitro er 3T3-L1-celler et værdifuldt modelsystem til fedme- og diabetesforskning samt til opdagelse af nye terapeutiske mål i forbindelse med stofskiftesygdomme

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring