3T3-L1

3T3-L1 šūnas ir preadipocītu klonu līnija, kas iegūta no peļu embrionālajiem fibroblastiem. Šīs šūnas ir kļuvušas par plaši izmantotu in vitro modeli adipoģenēzes procesa izpētei, tostarp adipoģenēzes un lipogenēzes, kas ir preadipocītu diferenciācija par adipocītiem (tauku šūnām). Nosaukums "3T3" attiecas uz pārneses (T) protokolu, kas paredzēja šūnu pārnesi ik pēc 3 dienām, un "L1" apzīmē konkrēto izdalīto klonu.

Sākotnēji 3T3-L1 šūnām ir fibroblastiem līdzīga morfoloģija, bet, inducējot 3T3-L1 šūnu diferenciāciju, 3T3-L1 šūnas no preadipocītu stāvokļa pāriet nobriedušu adipocītu stāvoklī un uzkrāj tauku pilienus, kas ir aptaukošanās un metaboliskā sindroma pazīme. Diferenciācijas procesu no 3T3-L1 preadipocītiem uz 3T3-L1 adipocītiem izraisa īpašs induktoru kokteilis, kas parasti ietver deksametazonu, 3-izobutil-1metilksantīnu (IBMX) un insulīnu.

Kad 3T3-L1 adipocīti iegūst nobriedušu adipocītu īpašības, tie sāk ekspresēt adipocītu funkcijām būtiskus gēnus, piemēram, tos, kas kodē taukskābju metabolismā iesaistītos enzīmus un tādus hormonus kā leptīns un adiponektīns, kuriem ir būtiska nozīme apetītes, enerģijas līdzsvara un jutības pret insulīnu regulēšanā. 3T3-L1 šūnu transformāciju izpēte uzlabo mūsu izpratni par adipoģenēzi, aptaukošanos un ar taukiem saistītām slimībām, piemēram, 2. tipa diabētu, atklājot, kā lipīdu uzkrāšanās adipocītos izraisa šūnu disfunkciju un plašākas vielmaiņas problēmas.

Turklāt 3T3-L1 šūnu līnija ir noderīga, pētot dažādu vielu ietekmi uz adipocītu uzvedību, piemēram, farmakoloģisko līdzekļu ietekmi uz lipolīzi vai dažu diētu pretiekaisuma īpašības, kas var novērst insulīna rezistenci.

3T3-L1 šūnas ir plaši izmantotas, lai pētītu molekulāros un šūnu mehānismus, kas ir adipocītu diferenciācijas, jutības pret insulīnu, lipīdu metabolisma un dažādu uztura un farmakoloģisko līdzekļu ietekmes uz šiem procesiem pamatā. Ņemot vērā 3T3-L1 šūnu spēju diferencēties par adipocītiem un to ērto kultivēšanu in vitro, tās ir vērtīga modeļa sistēma aptaukošanās un diabēta pētījumiem, kā arī jaunu terapeitisko mērķu atklāšanai saistībā ar metaboliskām slimībām

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu