Gå til innholdet
3T3-L1
Vev
Embryonale
Metastaseområde
Ikke relevant (embryonale preadipocytter; ikke-tumorinduserende)
Synonymer
3T3 L1, 3T3L1, 3T3-L1 ad, NIH-3T3-L1, NIH3T3-L1

Dokumenter

3T3-L1

Cell line · Produktnummer 400107

3T3-L1 cells are a clonal line of preadipocytes derived from mouse embryonic fibroblasts. These cells have become a widely used in vitro model for studyin...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

3T3-L1-celler er en klonal linje av preadipocytter avledet fra embryonale fibroblaster fra mus. Disse cellene har blitt en mye brukt in vitro-modell for å studere adipogeneseprosessen, inkludert adipogenese og lipogenese, som er differensieringen av preadipocytter til adipocytter (fettceller). Navnet "3T3" refererer til overføringsprotokollen (T), som innebar overføring av cellene hver tredje dag, og "L1" betegner den spesielle klonen som ble isolert.

I utgangspunktet har 3T3-L1-celler en fibroblastlignende morfologi, men ved induksjon av 3T3-L1-celledifferensiering endres 3T3-L1-celler fra en preadipocytt- til en moden adipocytttilstand og akkumulerer lipiddråper, et kjennetegn på fedme og metabolsk syndrom. Differensieringsprosessen fra 3T3-L1 preadipocytter til 3T3-L1 adipocytter utløses av en spesifikk cocktail av induktorer, som vanligvis inkluderer deksametason, 3-isobutyl-1-metylxantin (IBMX) og insulin.

Etter hvert som 3T3-L1 adipocytter antar egenskapene til modne adipocytter, begynner de å uttrykke gener som er avgjørende for adipocyttfunksjonen, for eksempel gener som koder for enzymer som er involvert i fettsyremetabolismen og hormoner som leptin og adiponektin, som spiller en viktig rolle i reguleringen av appetitt, energibalanse og insulinsensitivitet. Ved å studere 3T3-L1-cellenes transformasjon får vi en bedre forståelse av adipogenese, fedme og fettrelaterte sykdommer, som type 2-diabetes, ved å avdekke hvordan opphopning av lipider i adipocytter fører til celledysfunksjon og mer omfattende metabolske problemer.

3T3-L1-cellelinjen er dessuten viktig for å undersøke ulike stoffers innvirkning på adipocyttenes atferd, for eksempel effekten av farmakologiske midler på lipolysen eller de betennelsesdempende egenskapene til visse dietter som kan forebygge insulinresistens.

3T3-L1-celler har blitt brukt i utstrakt grad til å studere de molekylære og cellulære mekanismene som ligger til grunn for adipocyttdifferensiering, insulinfølsomhet, lipidmetabolisme og effekten av ulike ernæringsmessige og farmakologiske midler på disse prosessene. Siden 3T3-L1-celler kan differensieres til adipocytter og er enkle å dyrke in vitro, er de et verdifullt modellsystem for fedme- og diabetesforskning og for oppdagelsen av nye terapeutiske mål knyttet til metabolske sykdommer

Vev
Embryonale
Metastaseområde
Ikke relevant (embryonale preadipocytter; ikke-tumorinduserende)
Søknader
3T3-L1-celler har blitt brukt som et modellsystem for å forstå de molekylære mekanismene som regulerer adipogenese og lipidmetabolisme, og de har blitt brukt i forskning knyttet til fedme, diabetes og metabolske sykdommer. De er også en levedyktig vert for transfeksjon.
Synonymer
  • 3T3 L1
  • 3T3L1
  • 3T3-L1 ad
  • NIH-3T3-L1
  • NIH3T3-L1

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
Uten GMO
Detaljer om GMO-status
No genetic modification; 3T3-L1 is a subclone of the NIH/3T3 line selected for adipogenic differentiation potential; no introduced transgene
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastlignende
Celletype
Preadipocyt / adipocyt (ved differensiering)
Tumorinduserende
Nei
Ploidistatus
Aneuploid
Karyotype
2n=40

04Identifikatorer

Kildehenvisning
3T3-L1 (Cytion-katalognummer 400107)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0123

05Uttrykk og mottakelighet

Virusfølsomhet
Murint leukemivirus, murint sarkomvirus, vesikulær stomatitt, vaksinia, herpes simplex, N-tropiske onkornavirus C
Produkter
Insulin, kollagen, triglyserider

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 5
Såtetthet
1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
Væskefornyelse
Hver 2. til 3. dag
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
Sveitsisk albino
Donorens alder
Embryo