Gå direkt till innehållet
3T3-L1
Vävnad
Embryonal
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (embryonala preadipocyter; icke-tumörbildande)
Synonymer
3T3 L1, 3T3L1, 3T3-L1 ad, NIH-3T3-L1, NIH3T3-L1

3T3-L1

Cell line · Produktnummer 400107

3T3-L1 cells are a clonal line of preadipocytes derived from mouse embryonic fibroblasts. These cells have become a widely used in vitro model for studyin...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

3T3-L1-celler är en klonal linje av preadipocyter som härrör från musembryonala fibroblaster. Dessa celler har blivit en allmänt använd in vitro-modell för att studera adipogenesprocessen, inklusive adipogenes och lipogenes, vilket är differentieringen av preadipocyter till adipocyter (fettceller). Namnet "3T3" syftar på överföringsprotokollet (T) som innebar att cellerna överfördes var tredje dag, och "L1" betecknar den särskilda klon som isolerades.

Inledningsvis uppvisar 3T3-L1-celler en fibroblastliknande morfologi, men efter induktion av 3T3-L1-celldifferentiering övergår 3T3-L1-celler från preadipocyt till moget adipocyttillstånd och ackumulerar lipiddroppar, ett kännetecken för fetma och metabolt syndrom. Differentieringsprocessen från 3T3-L1 preadipocyter till 3T3-L1 adipocyter utlöses av en specifik cocktail av inducerare, som vanligtvis inkluderar dexametason, 3-isobutyl-1-metylxantin (IBMX) och insulin.

När 3T3-L1 adipocyterna antar de mogna adipocyternas egenskaper börjar de uttrycka gener som är avgörande för adipocyternas funktion, till exempel gener som kodar för enzymer som är involverade i fettsyrametabolismen och hormoner som leptin och adiponektin, vilka spelar en viktig roll i regleringen av aptit, energibalans och insulinkänslighet. Genom att studera omvandlingen av 3T3-L1-celler ökar vår förståelse för adipogenes, fetma och fettrelaterade sjukdomar, som typ 2-diabetes, eftersom det visar hur lipidackumulering i adipocyter leder till cellulär dysfunktion och mer omfattande metaboliska problem.

Dessutom är 3T3-L1-cellinjen viktig för att undersöka olika ämnens inverkan på adipocyternas beteende, t.ex. farmakologiska ämnens effekt på lipolysen eller de antiinflammatoriska egenskaperna hos vissa dieter som kan förebygga insulinresistens.

3T3-L1-celler har använts i stor utsträckning för att studera de molekylära och cellulära mekanismer som ligger bakom adipocyternas differentiering, insulinkänslighet, lipidmetabolism och effekterna av olika näringsämnen och farmakologiska medel på dessa processer. Eftersom 3T3-L1-cellerna kan differentieras till adipocyter och är lätta att odla in vitro, utgör de ett värdefullt modellsystem för forskning om fetma och diabetes samt för att upptäcka nya terapeutiska mål relaterade till metaboliska sjukdomar

Vävnad
Embryonal
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (embryonala preadipocyter; icke-tumörbildande)
Ansökningar
3T3-L1-celler har använts som modellsystem för att förstå de molekylära mekanismer som reglerar adipogenes och lipidmetabolism, och har använts i forskning relaterad till fetma, diabetes och metabola sjukdomar. De är också en livskraftig transfektionsvärd.
Synonymer
  • 3T3 L1
  • 3T3L1
  • 3T3-L1 ad
  • NIH-3T3-L1
  • NIH3T3-L1

02Klassificering

Organism
Mus
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
Utan genetiskt modifierade organismer
Detaljer om GMO-status
No genetic modification; 3T3-L1 is a subclone of the NIH/3T3 line selected for adipogenic differentiation potential; no introduced transgene
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastliknande
Celltyp
Preadipocyt / adipocyt (vid differentiering)
Tumörframkallande
Nej
Ploidistatus
Aneuploid
Karyotyp
2n=40

04Identifierare

Källa
3T3-L1 (Cytion katalognummer 400107)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0123

05Uttryck och mottaglighet

Virusmottaglighet
Murint leukemivirus, murint sarkomvirus, vesikulär stomatit, vaccinia, herpes simplex, N-tropiska oncornavirus C
Produkter
Insulin, kollagen, triglycerider

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Uppdelningsförhållande
1 till 5
Såtäthet
1 till 3 × 10⁴ celler/cm²
Vätskeförnyelse
Var 2:a till 3:e dag
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
Schweizisk albino
Donatorns ålder
Embryo