Μετάβαση στο περιεχόμενο
3T3-L1
Ιστός
Εμβρυϊκή
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (εμβρυϊκά προαδιποκύτταρα· μη ογκογόνα)
Συνώνυμα
3T3 L1, 3T3L1, 3T3-L1 ad, NIH-3T3-L1, NIH3T3-L1

Έγγραφα

3T3-L1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 400107

3T3-L1 cells are a clonal line of preadipocytes derived from mouse embryonic fibroblasts. These cells have become a widely used in vitro model for studyin...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

τα κύτταρα 3T3-L1 είναι μια κλωνική σειρά προαδιποκυττάρων που προέρχονται από εμβρυϊκούς ινοβλάστες ποντικού. Τα κύτταρα αυτά έχουν γίνει ένα ευρέως χρησιμοποιούμενο in vitro μοντέλο για τη μελέτη της διαδικασίας της λιπογένεσης, συμπεριλαμβανομένης της λιπογένεσης και της λιπογένεσης, η οποία είναι η διαφοροποίηση των προαδιποκυττάρων σε λιποκύτταρα (λιποκύτταρα). Η ονομασία "3T3" αναφέρεται στο πρωτόκολλο μεταφοράς (Τ) που περιελάμβανε τη μεταφορά των κυττάρων κάθε 3 ημέρες και το "L1" υποδηλώνει τον συγκεκριμένο κλώνο που απομονώθηκε.

Αρχικά, τα κύτταρα 3T3-L1 παρουσιάζουν μορφολογία που μοιάζει με ινοβλάστες, αλλά μετά την επαγωγή της διαφοροποίησης των κυττάρων 3T3-L1, τα κύτταρα 3T3-L1 μεταπίπτουν από την κατάσταση των προαδιποκυττάρων σε κατάσταση ώριμων λιποκυττάρων και συσσωρεύουν λιποσταγονίδια, χαρακτηριστικό γνώρισμα της παχυσαρκίας και του μεταβολικού συνδρόμου. Η διαδικασία διαφοροποίησης από τα προαδιποκύτταρα 3T3-L1 σε λιποκύτταρα 3T3-L1 ενεργοποιείται από ένα συγκεκριμένο κοκτέιλ επαγωγέων, που συνήθως περιλαμβάνει δεξαμεθαζόνη, 3-ισοβουτυλο-1-μεθυλοξανθίνη (IBMX) και ινσουλίνη.

Καθώς τα 3T3-L1 λιποκύτταρα υιοθετούν τα χαρακτηριστικά των ώριμων λιποκυττάρων, αρχίζουν να εκφράζουν γονίδια που είναι ζωτικής σημασίας για τη λειτουργία των λιποκυττάρων, όπως αυτά που κωδικοποιούν ένζυμα που εμπλέκονται στο μεταβολισμό των λιπαρών οξέων και ορμόνες όπως η λεπτίνη και η αδιπονεκτίνη, οι οποίες διαδραματίζουν ζωτικό ρόλο στη ρύθμιση της όρεξης, της ενεργειακής ισορροπίας και της ευαισθησίας στην ινσουλίνη. Η μελέτη των μετασχηματισμών των κυττάρων 3T3-L1 ενισχύει την κατανόηση της λιπογένεσης και της παχυσαρκίας και των ασθενειών που σχετίζονται με το λίπος, όπως ο διαβήτης τύπου 2, αποκαλύπτοντας πώς η συσσώρευση λιπιδίων στα λιποκύτταρα οδηγεί σε κυτταρική δυσλειτουργία και ευρύτερα μεταβολικά προβλήματα.

Επιπλέον, η κυτταρική σειρά 3T3-L1 συμβάλλει καθοριστικά στη διερεύνηση της επίδρασης διαφόρων ουσιών στη συμπεριφορά των λιποκυττάρων, όπως η επίδραση φαρμακολογικών παραγόντων στη λιπόλυση ή οι αντιφλεγμονώδεις ιδιότητες ορισμένων διαιτών που μπορεί να προλάβουν την αντίσταση στην ινσουλίνη.

τα κύτταρα 3T3-L1 έχουν χρησιμοποιηθεί εκτενώς για τη μελέτη των μοριακών και κυτταρικών μηχανισμών που διέπουν τη διαφοροποίηση των λιποκυττάρων, την ευαισθησία στην ινσουλίνη, τον μεταβολισμό των λιπιδίων και τις επιδράσεις διαφόρων διατροφικών και φαρμακολογικών παραγόντων στις διαδικασίες αυτές. Δεδομένης της ικανότητάς τους να διαφοροποιούνται σε λιποκύτταρα και της ευκολίας καλλιέργειάς τους in vitro, τα κύτταρα 3T3-L1 παρέχουν ένα πολύτιμο σύστημα-μοντέλο για την έρευνα της παχυσαρκίας και του διαβήτη, καθώς και για την ανακάλυψη νέων θεραπευτικών στόχων που σχετίζονται με τις μεταβολικές ασθένειες

Ιστός
Εμβρυϊκή
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (εμβρυϊκά προαδιποκύτταρα· μη ογκογόνα)
Εφαρμογές
τα κύτταρα 3T3-L1 έχουν χρησιμοποιηθεί ως πρότυπο σύστημα για την κατανόηση των μοριακών μηχανισμών που ρυθμίζουν τη λιπογένεση και τον μεταβολισμό των λιπιδίων και έχουν χρησιμοποιηθεί σε έρευνες που σχετίζονται με την παχυσαρκία, τον διαβήτη και τις μεταβολικές ασθένειες. Αποτελούν επίσης έναν βιώσιμο ξενιστή διαμόλυνσης.
Συνώνυμα
  • 3T3 L1
  • 3T3L1
  • 3T3-L1 ad
  • NIH-3T3-L1
  • NIH3T3-L1

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
Χωρίς ΓΤΟ
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
No genetic modification; 3T3-L1 is a subclone of the NIH/3T3 line selected for adipogenic differentiation potential; no introduced transgene
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινοβλάστες που μοιάζουν με ινοβλάστες
Τύπος κυττάρου
Προλιποκύτταρο / λιποκύτταρο (μετά τη διαφοροποίηση)
Ογκογόνος
Όχι
Πολυπλοειδής κατάσταση
Ανευπλοειδές
Καρυότυπος
2n=40

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
3T3-L1 (αριθμός καταλόγου Cytion 400107)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_0123

05Έκφραση και ευαισθησία

Ευαισθησία στον ιό
Ιός της λευχαιμίας του ποντικού, ιός του σαρκώματος του ποντικού, φυσαλιδώδης στοματίτιδα, εμβολιασμός, απλός έρπης, Ν-τροπικοί ογκοϊοί C
Προϊόντα
Ινσουλίνη, κολλαγόνο, τριγλυκερίδια

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 5
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 × 10⁴ κύτταρα/cm²
Ανανέωση υγρών
Κάθε 2 έως 3 ημέρες
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
Ελβετικό αλμπίνο
Ηλικία δωρητή
Έμβρυο