3T3-L1

Las células 3T3-L1 son una línea clonal de preadipocitos derivados de fibroblastos embrionarios de ratón. Estas células se han convertido en un modelo in vitro ampliamente utilizado para estudiar el proceso de la adipogénesis, incluyendo la adipogénesis y la lipogénesis, que es la diferenciación de los preadipocitos en adipocitos (células grasas). El nombre «3T3» se refiere al protocolo de transferencia (T) que consistía en transferir las células cada 3 días, y «L1» indica el clon específico que se aisló.

Inicialmente, las células 3T3-L1 presentan una morfología similar a la de los fibroblastos, pero tras la inducción de la diferenciación de las células 3T3-L1, estas pasan de un estado de preadipocitos a uno de adipocitos maduros y acumulan gotitas de lípidos, un rasgo característico de la obesidad y el síndrome metabólico. El proceso de diferenciación de los preadipocitos 3T3-L1 a adipocitos 3T3-L1 se desencadena mediante una combinación específica de inductores, que suele incluir dexametasona, 3-isobutil-1-metilxantina (IBMX) e insulina.

A medida que los adipocitos 3T3-L1 adoptan las características de los adipocitos maduros, comienzan a expresar genes que son cruciales para la función de los adipocitos, como los que codifican enzimas involucradas en el metabolismo de los ácidos grasos y hormonas como la leptina y la adiponectina, las cuales desempeñan un papel vital en la regulación del apetito, el equilibrio energético y la sensibilidad a la insulina. El estudio de las transformaciones de las células 3T3-L1 mejora nuestra comprensión de la adipogénesis, la obesidad y las enfermedades relacionadas con la grasa, como la diabetes tipo 2, al revelar cómo la acumulación de lípidos en los adipocitos conduce a la disfunción celular y a problemas metabólicos más amplios.

Además, la línea celular 3T3-L1 es fundamental para investigar el impacto de diversas sustancias en el comportamiento de los adipocitos, como el efecto de los agentes farmacológicos en la lipólisis o las propiedades antiinflamatorias de ciertas dietas que podrían prevenir la resistencia a la insulina.

Las células 3T3-L1 se han utilizado ampliamente para estudiar los mecanismos moleculares y celulares que subyacen a la diferenciación de los adipocitos, la sensibilidad a la insulina, el metabolismo lipídico y los efectos de diversos agentes nutricionales y farmacológicos sobre estos procesos. Dada su capacidad para diferenciarse en adipocitos y su facilidad de cultivo in vitro, las células 3T3-L1 constituyen un valioso sistema modelo para la investigación de la obesidad y la diabetes, así como para el descubrimiento de nuevas dianas terapéuticas relacionadas con las enfermedades metabólicas.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.