3T3-L1

3T3-L1-solut ovat hiiren alkion fibroblasteista peräisin olevien preadiposyyttien klooninen linja. Näistä soluista on tullut laajalti käytetty in vitro -malli adipogeneesin prosessin tutkimiseen, mukaan lukien adipogeneesi ja lipogeneesi, joka on preadiposyyttien erilaistuminen adiposyyteiksi (rasvasoluiksi). Nimi "3T3" viittaa siirtoprotokollaan (T), jossa soluja siirretään kolmen päivän välein, ja "L1" tarkoittaa tiettyä kloonia, joka eristettiin.

Aluksi 3T3-L1-soluilla on fibroblastin kaltainen morfologia, mutta 3T3-L1-solujen erilaistumisen indusoituaan 3T3-L1-solut muuttuvat preadiposyytistä kypsiksi adiposyyteiksi ja keräävät lipidipisaroita, jotka ovat lihavuuden ja metabolisen oireyhtymän tunnusmerkkejä. Erilaistumisprosessi 3T3-L1-preadiposyyteistä 3T3-L1-adiposyyteiksi käynnistyy erityisellä indusoijien cocktaililla, johon tyypillisesti kuuluvat deksametasoni, 3-isobutyyli-1-metyyliksantiini (IBMX) ja insuliini.

Kun 3T3-L1-adiposyytit omaksuvat kypsien adiposyyttien ominaisuudet, ne alkavat ilmentää adiposyyttien toiminnan kannalta ratkaisevia geenejä, kuten rasvahappojen aineenvaihduntaan osallistuvia entsyymejä koodaavia geenejä ja hormoneja, kuten leptiiniä ja adiponektiiniä, joilla on elintärkeä rooli ruokahalun, energiatasapainon ja insuliiniherkkyyden säätelyssä. 3T3-L1-solumuutosten tutkiminen parantaa käsitystämme adipogeneesistä, lihavuudesta ja rasvoittumiseen liittyvistä sairauksista, kuten tyypin 2 diabeteksesta, sillä se paljastaa, miten lipidien kertyminen adiposyyteihin johtaa solujen toimintahäiriöihin ja laajempiin aineenvaihduntaongelmiin.

Lisäksi 3T3-L1-solulinja on tärkeä väline tutkittaessa erilaisten aineiden vaikutusta adiposyyttien käyttäytymiseen, kuten farmakologisten aineiden vaikutusta lipolyysiin tai tiettyjen ruokavalioiden tulehdusta ehkäiseviä ominaisuuksia, jotka voivat ehkäistä insuliiniresistenssiä.

3T3-L1-soluja on käytetty laajalti adiposyyttien erilaistumisen, insuliiniherkkyyden ja rasva-aineenvaihdunnan taustalla olevien molekulaaristen ja solumekanismien sekä erilaisten ravitsemuksellisten ja farmakologisten aineiden vaikutusten tutkimiseen näihin prosesseihin. Koska 3T3-L1-solut kykenevät erilaistumaan adiposyyteiksi ja niitä on helppo viljellä in vitro, ne ovat arvokas mallijärjestelmä lihavuuden ja diabeteksen tutkimukseen sekä uusien aineenvaihduntasairauksiin liittyvien terapeuttisten kohteiden löytämiseen

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa