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3T3-L1
Gewebe
Embryonal
Metastasenherd
Nicht zutreffend (embryonale Präadipozyten; nicht tumorogen)
Synonyme
3T3 L1, 3T3L1, 3T3-L1 ad, NIH-3T3-L1, NIH3T3-L1

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3T3-L1

Cell line · Artikelnummer 400107

3T3-L1 cells are a clonal line of preadipocytes derived from mouse embryonic fibroblasts. These cells have become a widely used in vitro model for studyin...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

3T3-L1-Zellen sind eine klonale Linie von Präadipozyten, die von embryonalen Fibroblasten der Maus abstammen. Diese Zellen sind zu einem weit verbreiteten In-vitro-Modell für die Untersuchung des Prozesses der Adipogenese geworden, einschließlich der Adipogenese und der Lipogenese, d. h. der Differenzierung von Präadipozyten zu Adipozyten (Fettzellen). Der Name "3T3" bezieht sich auf das Transferprotokoll (T), bei dem die Zellen alle drei Tage transferiert werden, und "L1" steht für den speziellen Klon, der isoliert wurde.

Anfänglich weisen 3T3-L1-Zellen eine fibroblastenähnliche Morphologie auf, aber nach der Induktion der 3T3-L1-Zelldifferenzierung wandeln sich 3T3-L1-Zellen von einem Präadipozyten- in einen reifen Adipozytenzustand um und akkumulieren Lipidtropfen, ein Kennzeichen von Fettleibigkeit und metabolischem Syndrom. Der Differenzierungsprozess von 3T3-L1-Präadipozyten zu 3T3-L1-Adipozyten wird durch einen spezifischen Cocktail von Auslösern ausgelöst, zu denen in der Regel Dexamethason, 3-Isobutyl-1-methylxanthin (IBMX) und Insulin gehören.

Wenn die 3T3-L1-Adipozyten die Eigenschaften reifer Adipozyten annehmen, beginnen sie, Gene zu exprimieren, die für die Funktion der Adipozyten entscheidend sind, z. B. für Enzyme, die am Fettsäurestoffwechsel beteiligt sind, und für Hormone wie Leptin und Adiponektin, die bei der Regulierung von Appetit, Energiehaushalt und Insulinempfindlichkeit eine wichtige Rolle spielen. Die Untersuchung von 3T3-L1-Zelltransformationen verbessert unser Verständnis der Adipogenese, der Fettleibigkeit und fettbedingter Krankheiten wie Typ-2-Diabetes, indem sie aufzeigt, wie die Lipidakkumulation in Adipozyten zu zellulärer Dysfunktion und umfassenderen Stoffwechselproblemen führt.

Darüber hinaus ist die 3T3-L1-Zelllinie von entscheidender Bedeutung für die Untersuchung der Auswirkungen verschiedener Substanzen auf das Verhalten von Adipozyten, z. B. die Wirkung pharmakologischer Wirkstoffe auf die Lipolyse oder die entzündungshemmenden Eigenschaften bestimmter Diäten, die eine Insulinresistenz verhindern können.

3T3-L1-Zellen wurden ausgiebig zur Untersuchung der molekularen und zellulären Mechanismen verwendet, die der Differenzierung von Adipozyten, der Insulinsensitivität und dem Fettstoffwechsel zugrunde liegen, sowie zur Untersuchung der Auswirkungen verschiedener ernährungsbedingter und pharmakologischer Wirkstoffe auf diese Prozesse. Aufgrund ihrer Fähigkeit, sich in Adipozyten zu differenzieren, und ihrer einfachen Kultivierung in vitro stellen 3T3-L1-Zellen ein wertvolles Modellsystem für die Adipositas- und Diabetesforschung sowie für die Entdeckung neuer therapeutischer Ziele im Zusammenhang mit Stoffwechselkrankheiten dar

Gewebe
Embryonal
Metastasenherd
Nicht zutreffend (embryonale Präadipozyten; nicht tumorogen)
Anwendungen
3T3-L1-Zellen wurden als Modellsystem für das Verständnis der molekularen Mechanismen verwendet, die die Adipogenese und den Fettstoffwechsel regulieren, und wurden in der Forschung im Zusammenhang mit Fettleibigkeit, Diabetes und Stoffwechselkrankheiten eingesetzt. Sie sind auch ein brauchbarer Transfektionswirt.
Synonyme
  • 3T3 L1
  • 3T3L1
  • 3T3-L1 ad
  • NIH-3T3-L1
  • NIH3T3-L1

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
Ohne Gentechnik
Angaben zum GVO-Status
No genetic modification; 3T3-L1 is a subclone of the NIH/3T3 line selected for adipogenic differentiation potential; no introduced transgene
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblastenähnlich
Zelltyp
Präadipozyt / Adipozyt (nach Differenzierung)
Tumorauslösend
Nein
Ploidie-Status
Aneuploid
Karyotyp
2n=40

04Bezeichner

Quellenangabe
3T3-L1 (Cytion Katalognummer 400107)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_0123

05Expression und Anfälligkeit

Anfälligkeit für Viren
Murines Leukämievirus, Mäuse-Sarkom-Virus, vesikuläre Stomatitis, Vacciniavirus, Herpes simplex, N-tropische Oncornaviren C
Produkte
Insulin, Kollagen, Triglyceride

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Split-Verhältnis
1 bis 5
Aussaatdichte
1 bis 3 × 10⁴ Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
Alle 2 bis 3 Tage
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
Schweizer Albino
Alter des Spenders
Embryo