3T3-L1

Les cellules 3T3-L1 constituent une lignée clonale de préadipocytes dérivés de fibroblastes embryonnaires de souris. Ces cellules sont devenues un modèle in vitro largement utilisé pour l’étude du processus d’adipogenèse, notamment l’adipogenèse et la lipogenèse, c’est-à-dire la différenciation des préadipocytes en adipocytes (cellules adipeuses). Le nom « 3T3 » fait référence au protocole de transfert (T) qui consistait à transférer les cellules tous les 3 jours, et « L1 » désigne le clone particulier qui a été isolé.

Au départ, les cellules 3T3-L1 présentent une morphologie de type fibroblastique, mais lors de l’induction de leur différenciation, elles passent d’un état de préadipocytes à celui d’adipocytes matures et accumulent des gouttelettes lipidiques, une caractéristique distinctive de l’obésité et du syndrome métabolique. Le processus de différenciation des préadipocytes 3T3-L1 en adipocytes 3T3-L1 est déclenché par un cocktail spécifique d’inducteurs, comprenant généralement de la dexaméthasone, de la 3-isobutyl-1-méthylxanthine (IBMX) et de l’insuline.

À mesure que les adipocytes 3T3-L1 acquièrent les caractéristiques des adipocytes matures, ils commencent à exprimer des gènes essentiels au fonctionnement des adipocytes, tels que ceux codant pour des enzymes impliquées dans le métabolisme des acides gras et des hormones comme la leptine et l’adiponectine, qui jouent un rôle vital dans la régulation de l’appétit, du bilan énergétique et de la sensibilité à l’insuline. L’étude des transformations des cellules 3T3-L1 permet de mieux comprendre l’adipogenèse, l’obésité et les maladies liées à l’excès de graisse, comme le diabète de type 2, en mettant en lumière comment l’accumulation de lipides dans les adipocytes entraîne un dysfonctionnement cellulaire et des troubles métaboliques plus généraux.

De plus, la lignée cellulaire 3T3-L1 est essentielle pour étudier l’impact de diverses substances sur le comportement des adipocytes, comme l’effet d’agents pharmacologiques sur la lipolyse ou les propriétés anti-inflammatoires de certains régimes alimentaires susceptibles de prévenir la résistance à l’insuline.

Les cellules 3T3-L1 ont été largement utilisées pour étudier les mécanismes moléculaires et cellulaires sous-jacents à la différenciation des adipocytes, à la sensibilité à l’insuline, au métabolisme des lipides et aux effets de divers agents nutritionnels et pharmacologiques sur ces processus. Compte tenu de leur capacité à se différencier en adipocytes et de leur facilité de culture in vitro, les cellules 3T3-L1 constituent un système modèle précieux pour la recherche sur l’obésité et le diabète, ainsi que pour la découverte de nouvelles cibles thérapeutiques liées aux maladies métaboliques.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.