Skip to content
3T3-L1
Tissue
עוברי
Metastatic site
לא רלוונטי (תאי שומן עובריים; אינם גורמים לגידולים)
Synonyms
3T3 L1, 3T3L1, 3T3-L1 ad, NIH-3T3-L1, NIH3T3-L1

Documents

3T3-L1

Cell line · Product number 400107

3T3-L1 cells are a clonal line of preadipocytes derived from mouse embryonic fibroblasts. These cells have become a widely used in vitro model for studyin...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי 3T3-L1 הם קו קלונלי של תאי שומן מוקדמים שמקורם בפיברובלסטים עובריים של עכברים. תאים אלה הפכו למודל נפוץ במבחנה לחקר תהליך האדיפוגנזה, כולל אדיפוגנזה וליפוגנזה, שהוא תהליך ההבחנה של תאי שומן מוקדמים לתאי שומן (תאי שומן). השם "3T3" מתייחס לפרוטוקול ההעברה (T) שכלל העברת התאים כל 3 ימים, ו-"L1" מסמן את הקלונל הספציפי שבודד.

בתחילה, תאי 3T3-L1 מציגים מורפולוגיה דמוית פיברובלסט, אך עם גרימת התמיינות תאי 3T3-L1, תאי 3T3-L1 עוברים ממצב של תאי שומן מוקדמים למצב של תאי שומן בוגרים ומצטברים טיפות שומן, סימן היכר להשמנת יתר ותסמונת מטבולית. תהליך ההבחנה מתאי שומן מוקדמים 3T3-L1 לתאי שומן 3T3-L1 מופעל על ידי קוקטייל ספציפי של חומרים משרים, הכולל בדרך כלל דקסמתזון, 3-איזובוטיל-1-מתילקסנטין (IBMX) ואינסולין.

כאשר תאי השומן 3T3-L1 מאמצים את המאפיינים של תאי שומן בוגרים, הם מתחילים לבטא גנים החיוניים לתפקוד תאי השומן, כגון גנים המקודדים לאנזימים המעורבים במטבוליזם של חומצות שומן והורמונים כמו לפטין ואדיפונקטין, הממלאים תפקידים חיוניים בוויסות התיאבון, מאזן האנרגיה ורגישות לאינסולין. חקר התמורות בתאי 3T3-L1 משפר את הבנתנו לגבי אדיפוגנזה והשמנת יתר ומחלות הקשורות לשומן, כגון סוכרת מסוג 2, על ידי חשיפת האופן שבו הצטברות שומנים באדיפוציטים מובילה לתפקוד לקוי של התאים ולבעיות מטבוליות נרחבות יותר.

יתר על כן, קו התאים 3T3-L1 מסייע בחקר ההשפעה של חומרים שונים על התנהגות תאי השומן, כגון ההשפעה של חומרים פרמקולוגיים על ליפוליזה או התכונות האנטי-דלקתיות של דיאטות מסוימות העשויות למנוע עמידות לאינסולין.

תאי 3T3-L1 שימשו רבות לחקר המנגנונים המולקולריים והתאיים העומדים בבסיס התמיינות תאי השומן, רגישות לאינסולין, חילוף חומרים של שומנים והשפעת חומרים תזונתיים ופרמקולוגיים שונים על תהליכים אלה. בשל יכולתם להתמיין לתאי שומן וקלות הגידול שלהם במבחנה, תאי 3T3-L1 מהווים מערכת מודל חשובה למחקר השמנת יתר וסוכרת, כמו גם לגילוי מטרות טיפוליות חדשות הקשורות למחלות מטבוליות

Tissue
עוברי
Metastatic site
לא רלוונטי (תאי שומן עובריים; אינם גורמים לגידולים)
Applications
תאי 3T3-L1 שימשו כמערכת מודל להבנת המנגנונים המולקולריים המסדירים את יצירת השומן ואת חילוף החומרים של השומנים, והם שימשו במחקרים הקשורים להשמנת יתר, סוכרת ומחלות מטבוליות. הם גם מהווים מארח הטרנספקציה בר-קיימא.
Synonyms
  • 3T3 L1
  • 3T3L1
  • 3T3-L1 ad
  • NIH-3T3-L1
  • NIH3T3-L1

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; 3T3-L1 is a subclone of the NIH/3T3 line selected for adipogenic differentiation potential; no introduced transgene
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי פיברובלסט
Cell type
תאי שומן מוקדמים / תאי שומן (לאחר התמיינות)
Tumourigenic
לא
Ploidy status
אנאופלואידי
Karyotype
2n=40

04Identifiers

Citation
3T3-L1 (מספר קטלוגי Cytion 400107)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0123

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
נגיף לוקמיה עכברי, נגיף סרקומה עכברי, סטומטיטיס שלפוחיתית, ווקציניה, הרפס סימפלקס, אונקורנאווירוסים N-טרופיים C
Products
אינסולין, קולגן, טריגליצרידים

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Split ratio
1 עד 5
Seeding density
1 עד 3 × 10⁴ תאים/סמ"ר
Fluid renewal
כל 2-3 ימים
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
אלבינו שוויצרי
Donor age
עובר