Skip to content
3T3-L1
Tissue
ตัวอ่อน
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (เอ็มบริโอพรีแอดิโพไซต์; ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก)
Synonyms
3T3 L1, 3T3L1, 3T3-L1 ad, NIH-3T3-L1, NIH3T3-L1

Documents

3T3-L1

Cell line · Product number 400107

3T3-L1 cells are a clonal line of preadipocytes derived from mouse embryonic fibroblasts. These cells have become a widely used in vitro model for studyin...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ 3T3-L1 เป็นสายพันธุ์โคลนของพรีอะดิโพไซต์ที่ได้มาจากไฟโบรบลาสต์ของเอ็มบริโอหนู เซลล์เหล่านี้ได้กลายเป็นแบบจำลองที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในหลอดทดลองสำหรับการศึกษาการเกิดไขมัน รวมถึงการเกิดไขมันและการสร้างไขมัน ซึ่งเป็นกระบวนการที่พรีอะดิโพไซต์เปลี่ยนเป็นอะดิโพไซต์ (เซลล์ไขมัน)ชื่อ "3T3" หมายถึงโปรโตคอลการถ่ายโอน (T) ที่เกี่ยวข้องกับการถ่ายโอนเซลล์ทุก 3 วัน และ "L1" หมายถึงโคลนเฉพาะที่ถูกแยกออกมา

ในระยะแรก เซลล์ 3T3-L1 มีลักษณะคล้ายไฟโบรบลาสต์ แต่เมื่อมีการเหนี่ยวนำให้เกิดการเปลี่ยนสภาพของเซลล์ 3T3-L1 เซลล์จะเปลี่ยนจากสถานะพรีอะดิโพไซต์ไปเป็นอะดิโพไซต์ที่เจริญเต็มที่ และสะสมหยดไขมัน ซึ่งเป็นลักษณะเด่นของโรคอ้วนและกลุ่มอาการเมตาบอลิกกระบวนการเปลี่ยนแปลงจากเซลล์พรีอะดิโพไซต์ 3T3-L1 ไปเป็นเซลล์ไขมัน 3T3-L1 ถูกกระตุ้นโดยการใช้สารกระตุ้นเฉพาะกลุ่ม ซึ่งโดยทั่วไปประกอบด้วย 덱ซาเมทาโซน, 3-ไอโซบิวทิล-1-เมทิลแซนทีน (IBMX), และอินซูลิน

เมื่อเซลล์ไขมัน 3T3-L1 เริ่มมีลักษณะของเซลล์ไขมันที่สมบูรณ์แล้ว พวกมันจะเริ่มแสดงออกของยีนที่มีความสำคัญต่อการทำงานของเซลล์ไขมัน เช่น ยีนที่เข้ารหัสเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับการเผาผลาญกรดไขมัน และฮอร์โมนเช่น เลปติน และอะดิโพเนคติน ซึ่งมีบทบาทสำคัญในการควบคุมความอยากอาหาร สมดุลพลังงาน และความไวต่ออินซูลินการศึกษาการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ 3T3-L1 ช่วยเพิ่มความเข้าใจของเราเกี่ยวกับการเกิดไขมันขาว (adipogenesis) และโรคอ้วน รวมถึงโรคที่เกี่ยวข้องกับไขมัน เช่น โรคเบาหวานชนิดที่ 2 โดยการเปิดเผยว่า การสะสมของไขมันในเซลล์ไขมัน (adipocytes) นำไปสู่การเสื่อมของเซลล์และปัญหาการเผาผลาญที่กว้างขวางขึ้นอย่างไร

นอกจากนี้ สายพันธุ์เซลล์ 3T3-L1 ยังมีความสำคัญอย่างยิ่งในการศึกษาผลกระทบของสารต่าง ๆ ต่อพฤติกรรมของเซลล์ไขมัน เช่น ฤทธิ์ของสารทางเภสัชวิทยาที่มีต่อการสลายไขมัน หรือคุณสมบัติต้านการอักเสบของอาหารบางประเภทที่อาจช่วยป้องกันภาวะดื้อต่ออินซูลิน

เซลล์ 3T3-L1 ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในการศึกษาเชิงโมเลกุลและเซลล์ของกลไกที่อยู่เบื้องหลังการเปลี่ยนสภาพของเซลล์ไขมัน (adipocyte differentiation) ความไวต่ออินซูลิน การเผาผลาญไขมัน และผลกระทบของสารอาหารและยาต่าง ๆ ต่อกระบวนการเหล่านี้ ด้วยความสามารถในการเปลี่ยนสภาพเป็นเซลล์ไขมันและความง่ายในการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลอง เซลล์ 3T3-L1 จึงเป็นระบบแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการวิจัยเกี่ยวกับโรคอ้วนและเบาหวาน รวมถึงการค้นพบเป้าหมายการรักษาใหม่ ๆ ที่เกี่ยวข้องกับโรคเมตาบอลิก

Tissue
ตัวอ่อน
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (เอ็มบริโอพรีแอดิโพไซต์; ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก)
Applications
เซลล์ 3T3-L1 ได้ถูกนำมาใช้เป็นระบบแบบจำลองเพื่อทำความเข้าใจกลไกทางโมเลกุลที่ควบคุมการเกิดไขมันและการเผาผลาญไขมัน และได้ถูกนำไปใช้ในการวิจัยที่เกี่ยวข้องกับโรคอ้วน โรคเบาหวาน และโรคเมตาบอลิก นอกจากนี้ยังเป็นโฮสต์ที่สามารถรับการถ่ายโอนยีนได้อีกด้วย
Synonyms
  • 3T3 L1
  • 3T3L1
  • 3T3-L1 ad
  • NIH-3T3-L1
  • NIH3T3-L1

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; 3T3-L1 is a subclone of the NIH/3T3 line selected for adipogenic differentiation potential; no introduced transgene
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Cell type
พรีอะดิโพไซต์ / อะดิโพไซต์ (หลังการแยกตัว)
Tumourigenic
ไม่
Ploidy status
อะนีพลอยด์
Karyotype
2n เท่ากับ 40

04Identifiers

Citation
3T3-L1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 400107)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0123

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
ไวรัสลูคีเมียในหนู, ไวรัสซาร์โคมาในหนู, โรคปากและเท้าเปื่อย, ไวรัสวัคซีน, เริม, ไวรัส N-tropic oncornaviruses C
Products
อินซูลิน, คอลลาเจน, ไตรกลีเซอไรด์

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
1 ถึง 3 × 10⁴ เซลล์/ตารางเซนติเมตร
Fluid renewal
ทุก 2 ถึง 3 วัน
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
ชาวสวิสเผือก
Donor age
เอ็มบริโอ