3T3-L1

As células 3T3-L1 são uma linhagem clonal de pré-adipócitos derivados de fibroblastos embrionários de camundongo. Essas células tornaram-se um modelo in vitro amplamente utilizado para o estudo do processo de adipogênese, incluindo a adipogênese e a lipogênese, que consiste na diferenciação de pré-adipócitos em adipócitos (células adiposas). O nome “3T3” refere-se ao protocolo de transferência (T) que envolvia a transferência das células a cada 3 dias, e “L1” indica o clone específico que foi isolado.

Inicialmente, as células 3T3-L1 apresentam uma morfologia semelhante à dos fibroblastos, mas, após a indução da diferenciação das células 3T3-L1, elas passam do estado de pré-adipócitos para o de adipócitos maduros e acumulam gotículas lipídicas, uma característica marcante da obesidade e da síndrome metabólica. O processo de diferenciação dos pré-adipócitos 3T3-L1 em adipócitos 3T3-L1 é desencadeado por um coquetel específico de indutores, que normalmente inclui dexametasona, 3-isobutil-1-metilxantina (IBMX) e insulina.

À medida que os adipócitos 3T3-L1 assumem as características dos adipócitos maduros, eles passam a expressar genes essenciais para a função adipocitária, como aqueles que codificam enzimas envolvidas no metabolismo dos ácidos graxos e hormônios como a leptina e a adiponectina, que desempenham papéis vitais na regulação do apetite, do equilíbrio energético e da sensibilidade à insulina. O estudo das transformações das células 3T3-L1 amplia nossa compreensão da adipogênese, da obesidade e das doenças relacionadas à gordura, como o diabetes tipo 2, ao revelar como o acúmulo de lipídios nos adipócitos leva à disfunção celular e a problemas metabólicos mais amplos.

Além disso, a linhagem celular 3T3-L1 é fundamental para investigar o impacto de várias substâncias no comportamento dos adipócitos, como o efeito de agentes farmacológicos na lipólise ou as propriedades anti-inflamatórias de certas dietas que podem prevenir a resistência à insulina.

As células 3T3-L1 têm sido amplamente utilizadas para estudar os mecanismos moleculares e celulares subjacentes à diferenciação dos adipócitos, à sensibilidade à insulina, ao metabolismo lipídico e aos efeitos de diversos agentes nutricionais e farmacológicos sobre esses processos. Devido à sua capacidade de se diferenciarem em adipócitos e à facilidade de cultura in vitro, as células 3T3-L1 constituem um valioso sistema-modelo para pesquisas sobre obesidade e diabetes, bem como para a descoberta de novos alvos terapêuticos relacionados a doenças metabólicas

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.