Preskoči na vsebino
3T3-L1
Tkivo
Embrionalni
Mesto metastaze
Ne velja (embrionalni preadipocit; netumorigeničen)
Sinonimi
3T3 L1, 3T3L1, 3T3-L1 ad, NIH-3T3-L1, NIH3T3-L1

Dokumenti

3T3-L1

Cell line · Številka izdelka 400107

3T3-L1 cells are a clonal line of preadipocytes derived from mouse embryonic fibroblasts. These cells have become a widely used in vitro model for studyin...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

celice 3T3-L1 so klonska linija preadipocitov, pridobljenih iz mišjih embrionalnih fibroblastov. Te celice so postale široko uporabljen in vitro model za preučevanje procesa adipogeneze, vključno z adipogenezo in lipogenezo, ki je diferenciacija preadipocitov v adipocite (maščobne celice). Ime "3T3" se nanaša na protokol prenosa (T), ki je vključeval prenos celic vsake tri dni, "L1" pa označuje poseben klon, ki je bil izoliran.

Na začetku imajo celice 3T3-L1 morfologijo, podobno fibroblastom, po indukciji diferenciacije celic 3T3-L1 pa se celice 3T3-L1 spremenijo iz predadipocitnega v zrelo adipocitno stanje in kopičijo kapljice lipidov, kar je značilnost debelosti in presnovnega sindroma. Proces diferenciacije iz preadipocitov 3T3-L1 v adipocite 3T3-L1 sproži poseben koktajl induktorjev, ki običajno vključuje deksametazon, 3-izobutil-1-metilksantin (IBMX) in inzulin.

Ko adipociti 3T3-L1 pridobijo značilnosti zrelih adipocitov, začnejo izražati gene, ki so ključni za delovanje adipocitov, kot so tisti, ki kodirajo encime, vključene v presnovo maščobnih kislin, in hormone, kot sta leptin in adiponektin, ki imajo ključno vlogo pri uravnavanju apetita, energijske bilance in občutljivosti na inzulin. Preučevanje transformacij celic 3T3-L1 izboljšuje naše razumevanje adipogeneze in debelosti ter bolezni, povezanih z maščobami, kot je sladkorna bolezen tipa 2, saj razkriva, kako kopičenje lipidov v adipocitih vodi v celično disfunkcijo in širše presnovne težave.

Poleg tega je celična linija 3T3-L1 koristna pri raziskovanju vpliva različnih snovi na obnašanje adipocitov, na primer vpliva farmakoloških sredstev na lipolizo ali protivnetnih lastnosti nekaterih diet, ki lahko preprečijo inzulinsko rezistenco.

celice 3T3-L1 so se pogosto uporabljale za preučevanje molekularnih in celičnih mehanizmov, na katerih temelji diferenciacija adipocitov, občutljivost na inzulin, presnova lipidov ter učinki različnih prehranskih in farmakoloških snovi na te procese. Zaradi sposobnosti diferenciacije v adipocite in enostavnega gojenja in vitro so celice 3T3-L1 dragocen modelni sistem za raziskave debelosti in sladkorne bolezni ter za odkrivanje novih terapevtskih tarč, povezanih s presnovnimi boleznimi

Tkivo
Embrionalni
Mesto metastaze
Ne velja (embrionalni preadipocit; netumorigeničen)
Uporaba
celice 3T3-L1 se uporabljajo kot modelni sistem za razumevanje molekularnih mehanizmov, ki uravnavajo adipogenezo in presnovo lipidov, ter se uporabljajo v raziskavah, povezanih z debelostjo, sladkorno boleznijo in presnovnimi boleznimi. So tudi primeren gostitelj za transfekcijo.
Sinonimi
  • 3T3 L1
  • 3T3L1
  • 3T3-L1 ad
  • NIH-3T3-L1
  • NIH3T3-L1

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
Brez gensko spremenjenih organizmov
Podrobnosti o statusu GSO
No genetic modification; 3T3-L1 is a subclone of the NIH/3T3 line selected for adipogenic differentiation potential; no introduced transgene
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblastom podobni
Vrsta celice
Preadipocit / adipocit (po diferenciaciji)
Tumorigeničen
Ne
Ploidnost
Aneuploidni
Kariotip
2n=40

04Identifikatorji

Navajanje vira
3T3-L1 (kataloška številka Cytion 400107)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0123

05Izražanje in dovzetnost

Občutljivost na virus
Virus Murine levkemije, virus Murine sarkoma, vezikularni stomatitis, vakcinije, herpes simpleks, N-tropni onkornavirusi C
Izdelki
Inzulin, kolagen, trigliceridi

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 5
Gostota setve
1 do 3 × 10⁴ celic/cm²
Obnova tekočine
Vsakih 2 do 3 dni
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
Švicarski albino
Starost darovalca
Zarodek