3T3-L1

خلايا 3T3-L1 هي سلالة من الخلايا الشحمية المسبقة المشتقة من الخلايا الليفية الجنينية للفأر. وقد أصبحت هذه الخلايا نموذجاً مستخدماً على نطاق واسع في المختبر لدراسة عملية تكوّن الشحمية، بما في ذلك تكوّن الشحوم وتكوين الدهون، وهو تمايز الخلايا الشحمية المسبقة إلى خلايا شحمية (خلايا دهنية). يشير الاسم "3T3" إلى بروتوكول النقل (T) الذي يتضمن نقل الخلايا كل 3 أيام، ويشير "L1" إلى المستنسخ المحدد الذي تم عزله.

في البداية، تُظهر خلايا "3T3-L1" مورفولوجيا تشبه الخلايا الليفية، ولكن عند تحريض تمايز خلايا 3T3-L1 تتحول خلايا 3T3-L1 من حالة ما قبل الخلايا الشحمية إلى حالة الخلايا الشحمية الناضجة وتتراكم فيها قطرات الدهون، وهي سمة مميزة للسمنة ومتلازمة التمثيل الغذائي. يتم تحفيز عملية التمايز من الخلايا الشحمية 3T3-L1 قبل الشحمية إلى الخلايا الشحمية 3T3-L1 بواسطة مزيج محدد من المحفزات، بما في ذلك عادةً ديكساميثازون و3-إيزوبوتيل-1-ميثيل زانثين (IBMX) والأنسولين.

ومع تبني الخلايا الشحمية 3T3-L1 لخصائص الخلايا الشحمية الناضجة، تبدأ في التعبير عن الجينات التي تعتبر حاسمة لوظيفة الخلايا الشحمية، مثل تلك التي ترمز إلى الإنزيمات المشاركة في استقلاب الأحماض الدهنية والهرمونات مثل اللبتين والأديبونيكتين، والتي تلعب أدوارًا حيوية في تنظيم الشهية وتوازن الطاقة وحساسية الأنسولين. إن دراسة تحولات الخلايا 3T3-L1 تعزز فهمنا لتكوين الخلايا الشحمية والسمنة والأمراض المرتبطة بالدهون، مثل داء السكري من النوع الثاني، من خلال الكشف عن كيفية تراكم الدهون في الخلايا الشحمية التي تؤدي إلى خلل وظيفي خلوي ومشاكل أيضية أوسع نطاقًا.

وعلاوة على ذلك، فإن خط الخلايا 3T3-L1 مفيد في دراسة تأثير المواد المختلفة على سلوك الخلايا الشحمية، مثل تأثير العوامل الدوائية على تحلل الدهون أو الخصائص المضادة للالتهابات لبعض الأنظمة الغذائية التي قد تمنع مقاومة الأنسولين.

وقد استُخدمت خلايا 3T3-L1 على نطاق واسع لدراسة الآليات الجزيئية والخلوية الكامنة وراء تمايز الخلايا الشحمية وحساسية الأنسولين والتمثيل الغذائي للدهون وتأثيرات العوامل الغذائية والدوائية المختلفة على هذه العمليات. ونظراً لقدرتها على التمايز في الخلايا الشحمية وسهولة استزراعها في المختبر، توفر خلايا 3T3-L1 نظاماً نموذجياً قيماً لأبحاث السمنة ومرض السكري، وكذلك لاكتشاف أهداف علاجية جديدة تتعلق بأمراض التمثيل الغذائي

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان