3T3-L1

3T3-L1 rakud on hiirte embrüonaalsetest fibroblastidest saadud preadipotsüütide klonaalne liin. Need rakud on saanud laialdaselt kasutatavaks in vitro mudeliks adipogeneesi, sealhulgas adipogeneesi ja lipogeneesi, mis on preadipotsüütide diferentseerumine adipotsüütideks (rasvarakkudeks), uurimiseks. Nimetus "3T3" viitab ülekandeprotokollile (T), mis hõlmas rakkude ülekandmist iga kolme päeva järel, ja "L1" tähistab konkreetset isoleeritud klooni.

Esialgu on 3T3-L1 rakkudel fibroblastilaadne morfoloogia, kuid 3T3-L1 rakkude diferentseerimise indutseerimisel muutuvad 3T3-L1 rakud preadipotsüüdist küpseks adipotsüüdiks ja akumuleerivad lipiidipisaraid, mis on rasvumise ja metaboolse sündroomi tunnuseks. 3T3-L1 preadipotsüütidest 3T3-L1 adipotsüütideks diferentseerumise protsessi käivitab spetsiifiline indutseerijate kokteil, mis tavaliselt sisaldab deksametasooni, 3-isobutüül-1-metüülksantiini (IBMX) ja insuliini.

Kui 3T3-L1 adipotsüüdid võtavad omaks küpsete adipotsüütide omadused, hakkavad nad ekspresseerima geene, mis on adipotsüütide funktsiooni jaoks olulised, näiteks neid, mis kodeerivad rasvhapete ainevahetuses osalevaid ensüüme ja hormoone nagu leptiin ja adiponektiin, mis mängivad olulist rolli söögiisu, energiatasakaalu ja insuliinitundlikkuse reguleerimisel. 3T3-L1 rakkude muundumise uurimine parandab meie arusaamist adipogeneesist ja rasvumisest ning rasvaga seotud haigustest, nagu 2. tüüpi diabeet, sest see näitab, kuidas lipiidide kogunemine adipotsüütidesse põhjustab rakkude talitlushäireid ja laiemaid ainevahetusprobleeme.

Lisaks sellele aitab 3T3-L1 rakuliin uurida erinevate ainete mõju adipotsüütide käitumisele, näiteks farmakoloogiliste ainete mõju lipolüüsile või teatud toitude põletikuvastaseid omadusi, mis võivad ennetada insuliiniresistentsust.

3T3-L1 rakke on laialdaselt kasutatud adipotsüütide diferentseerumise, insuliinitundlikkuse ja lipiidide metabolismi aluseks olevate molekulaarsete ja rakuliste mehhanismide ning erinevate toitumis- ja farmakoloogiliste ainete mõju uurimiseks nendele protsessidele. Arvestades nende võimet diferentseeruda adipotsüütideks ja nende lihtsat kasvatamist in vitro, on 3T3-L1 rakud väärtuslik mudelisüsteem rasvumise ja diabeedi uurimiseks ning uute, ainevahetushaigustega seotud terapeutiliste sihtmärkide avastamiseks

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest