Tartalomra ugrás
3T3-L1
Szövet
Embrionális
Áttétes hely
Nem alkalmazható (embrionális preadipocita; nem tumorigenikus)
Szinonimák
3T3 L1, 3T3L1, 3T3-L1 ad, NIH-3T3-L1, NIH3T3-L1

Dokumentumok

3T3-L1

Cell line · Termékszám 400107

3T3-L1 cells are a clonal line of preadipocytes derived from mouse embryonic fibroblasts. These cells have become a widely used in vitro model for studyin...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

a 3T3-L1 sejtek az egér embrionális fibroblasztokból származó preadipociták klonális vonala. Ezek a sejtek széles körben használt in vitro modellé váltak az adipogenezis folyamatának tanulmányozására, beleértve az adipogenezist és a lipogenezist, amely a preadipociták adipocitákká (zsírsejtekké) történő differenciálódását jelenti. A "3T3" elnevezés a transzfer (T) protokollra utal, amely a sejtek 3 naponkénti átültetését jelentette, az "L1" pedig az izolált klónt jelöli.

Kezdetben a 3T3-L1 sejtek fibroblaszt-szerű morfológiát mutatnak, de a 3T3-L1 sejtdifferenciáció indukcióját követően a 3T3-L1 sejtek preadipocita állapotból érett adipocita állapotba kerülnek, és felhalmozzák a lipidcseppeket, ami az elhízás és a metabolikus szindróma egyik jellemzője. A 3T3-L1 preadipocitákból 3T3-L1 adipocitákká történő differenciálódási folyamatot induktorok specifikus koktélja indukálja, amely jellemzően dexametazon, 3-izobutil-1-metilxantin (IBMX) és inzulin.

Ahogy a 3T3-L1 adipociták átveszik az érett adipociták jellemzőit, elkezdik expresszálni az adipocita működéséhez elengedhetetlen géneket, például a zsírsav-anyagcserében részt vevő enzimeket és az olyan hormonokat, mint a leptin és az adiponektin, amelyek létfontosságú szerepet játszanak az étvágy, az energiaegyensúly és az inzulinérzékenység szabályozásában. A 3T3-L1 sejtek átalakulásának tanulmányozása javítja az adipogenezis, az elhízás és a zsírral kapcsolatos betegségek, például a 2-es típusú cukorbetegség megértését azáltal, hogy feltárja, hogyan vezet a lipidek felhalmozódása az adipocitákban sejtműködési zavarokhoz és szélesebb körű anyagcsere-problémákhoz.

A 3T3-L1 sejtvonal továbbá fontos szerepet játszik a különböző anyagok adipocita viselkedésre gyakorolt hatásának vizsgálatában, például a farmakológiai szerek lipolízisre gyakorolt hatását vagy bizonyos diéták gyulladáscsökkentő tulajdonságait, amelyek megakadályozhatják az inzulinrezisztenciát.

a 3T3-L1 sejteket széles körben használták az adipociták differenciálódásának, az inzulinérzékenységnek, a lipidanyagcserének, valamint a különböző táplálkozási és farmakológiai szerek e folyamatokra gyakorolt hatásának tanulmányozására. Mivel a 3T3-L1 sejtek képesek adipocitákká differenciálódni és könnyen tenyészthetők in vitro, értékes modellrendszert jelentenek az elhízás és a cukorbetegség kutatásához, valamint az anyagcsere-betegségekkel kapcsolatos új terápiás célpontok felfedezéséhez

Szövet
Embrionális
Áttétes hely
Nem alkalmazható (embrionális preadipocita; nem tumorigenikus)
Alkalmazások
a 3T3-L1 sejteket modellrendszerként használták az adipogenezist és a lipidanyagcserét szabályozó molekuláris mechanizmusok megértéséhez, és az elhízással, cukorbetegséggel és anyagcsere-betegségekkel kapcsolatos kutatásokban is felhasználták őket. Emellett életképes transzfekciós gazdaszervezetnek is alkalmasak.
Szinonimák
  • 3T3 L1
  • 3T3L1
  • 3T3-L1 ad
  • NIH-3T3-L1
  • NIH3T3-L1

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-mentes
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
No genetic modification; 3T3-L1 is a subclone of the NIH/3T3 line selected for adipogenic differentiation potential; no introduced transgene
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblaszt-szerű
Sejttípus
Előzsírsejt / zsírsejt (differenciálódás után)
Daganatképző
Nem
Ploidiaállapot
Aneuploid
Kariotípus
2n=40

04Azonosítók

Hivatkozás
3T3-L1 (Cytion katalógusszám: 400107)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_0123

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusérzékenység
Egérleukémiavírus, egérszarkóma vírus, hólyagos szájgyulladás, vakcina, herpes simplex, N-trópikus onkornavírusok C
Termékek
Inzulin, kollagén, trigliceridek

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–5
Ültetési sűrűség
1–3 × 10⁴ sejt/cm²
Folyadékcsere
2-3 naponta
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
Svájci albínó
Az adományozó életkora
Embrió