3T3-L1

as células 3T3-L1 são uma linha clonal de pré-adipócitos derivados de fibroblastos embrionários de ratinho. Estas células tornaram-se um modelo in vitro muito utilizado para estudar o processo de adipogénese, incluindo a adipogénese e a lipogénese, que é a diferenciação dos pré-adipócitos em adipócitos (células adiposas). O nome "3T3" refere-se ao protocolo de transferência (T) que envolveu a transferência das células de 3 em 3 dias, e "L1" significa o clone específico que foi isolado.

Inicialmente, as células 3T3-L1 apresentam uma morfologia semelhante à dos fibroblastos, mas após a indução da diferenciação das células 3T3-L1, estas passam de um estado de pré-adipócito para um estado de adipócito maduro e acumulam gotículas de lípidos, uma caraterística da obesidade e da síndrome metabólica. O processo de diferenciação dos pré-adipócitos 3T3-L1 em adipócitos 3T3-L1 é desencadeado por um cocktail específico de indutores, que inclui normalmente dexametasona, 3-isobutil-1-metilxantina (IBMX) e insulina.

À medida que os adipócitos 3T3-L1 adoptam as caraterísticas dos adipócitos maduros, começam a expressar genes que são cruciais para a função dos adipócitos, tais como os que codificam as enzimas envolvidas no metabolismo dos ácidos gordos e hormonas como a leptina e a adiponectina, que desempenham papéis vitais na regulação do apetite, do equilíbrio energético e da sensibilidade à insulina. O estudo das transformações das células 3T3-L1 melhora a nossa compreensão da adipogénese e da obesidade e das doenças relacionadas com a gordura, como a diabetes tipo 2, ao revelar como a acumulação de lípidos nos adipócitos conduz à disfunção celular e a problemas metabólicos mais vastos.

Além disso, a linha celular 3T3-L1 é fundamental para investigar o impacto de várias substâncias no comportamento dos adipócitos, como o efeito de agentes farmacológicos na lipólise ou as propriedades anti-inflamatórias de certas dietas que podem prevenir a resistência à insulina.

as células 3T3-L1 têm sido amplamente utilizadas para estudar os mecanismos moleculares e celulares subjacentes à diferenciação dos adipócitos, à sensibilidade à insulina, ao metabolismo lipídico e aos efeitos de vários agentes nutricionais e farmacológicos nestes processos. Dada a sua capacidade de se diferenciarem em adipócitos e a sua facilidade de cultura in vitro, as células 3T3-L1 constituem um sistema modelo valioso para a investigação da obesidade e da diabetes, bem como para a descoberta de novos alvos terapêuticos relacionados com a doença metabólica

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia