
- Tissu
- Col de l'utérus
- Maladie
- Adénocarcinome cervical (lignée HeLa) ; transfecté de manière stable avec GFP-EB3 (marqueur de l'extrémité « plus » des microtubules)
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HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24
Cell line · Référence du produit 305718
HeLa EB3-GFP Kirc 14 est un dérivé génétiquement modifié de la lignée cellulaire HeLa, issue d'un carcinome cervical humain, conçu pour exprimer de manière stable une protéine EB3 marquée par la GFP (e...
Personnalisation / Recommandations
- HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24Cell line€800.00
Recommandé (lot le plus récent)
01Informations générales
- Description
HeLa EB3-GFP Kirc 14 est un dérivé génétiquement modifié de la lignée cellulaire HeLa issue d’un carcinome cervical humain, conçu pour exprimer de manière stable une construction de fusion EB3 (protéine de liaison aux extrémités 3) marquée par la GFP, avec « Kirc 14 » désignant un sous-clone spécifique (clone 14) sélectionné parmi le pool transfecté. L’EB3 fait partie de la famille des protéines de liaison aux extrémités qui suivent les extrémités « plus » des microtubules en croissance et sert de marqueur pour le comportement dynamique des microtubules dans les cellules vivantes. La protéine de fusion GFP-EB3 produit des signaux fluorescents caractéristiques en forme de comète à l’extrémité des microtubules en cours de polymérisation, permettant ainsi l’imagerie en temps réel de la dynamique des microtubules, du transport intracellulaire et de l’organisation du cytosquelette dans des cellules vivantes.
HeLa EB3-GFP Kirc 14 est utilisé en recherche en biologie cellulaire pour l’imagerie en cellules vivantes de la dynamique des extrémités « plus » des microtubules, les études sur l’assemblage du fuseau mitotique et les interactions entre les kinétochores et les microtubules, les recherches sur le transport intracellulaire de cargaisons, ainsi que l’évaluation de composés affectant la dynamique de polymérisation des microtubules. L’expression subclonale stable de GFP-EB3 garantit une intensité et un profil de fluorescence constants d’un passage à l’autre, ce qui rend le clone 14 adapté aux tests d’imagerie quantitative et au criblage à haut débit d’agents ciblant les microtubules.
- Tissu
- Col de l'utérus
- Maladie
- Adénocarcinome cervical (lignée HeLa) ; transfecté de manière stable avec GFP-EB3 (marqueur de l'extrémité « plus » des microtubules)
- Applications
- Imagerie de la dynamique des microtubules dans des cellules vivantes ; études sur le fuseau mitotique ; recherche sur les interactions entre les kinétochores et les microtubules ; transport intracellulaire ; criblage de médicaments ciblant les microtubules
02Classification
- Organisme
- Humain
- Propriétés de croissance
- Adepte
- Statut OGM
- GMO-S1
- Informations détaillées sur le statut OGM
- GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Niveau de biosécurité
- 1
03Caractéristiques
- Morphologie
- De type épithélial
- Type de cellule
- Cellules épithéliales
- Temps de doublement
- environ 24 heures
04Identifiants
- Référence
- HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (référence Cytion 305718)
- Numéro d'identification fiscale NCBI
- 9606
05Manipulation et culture
- Milieu de culture
- DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
- Atmosphère d'incubation
37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.
- Compléments alimentaires
- Compléter le milieu avec 10% de FBS
- Réactif de dissociation
- Accutase, 10 min, 37 °C
- Repiquage
- Retirez l'ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS. Recouvrez-les d'Accutase, incubez à température ambiante pendant 8 à 10 minutes, remettez-les en suspension dans du milieu, centrifugez à 300 × g pendant 3 minutes, puis transférez-les dans des flacons neufs contenant du milieu de sélection.
- Rapport de fractionnement
- 1 à 5
- Densité de semis
- 1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
- Renouvellement des fluides
- 2 à 3 fois par semaine
- Décongélation et mise en culture
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Contrôle qualité et cryoconservation
- Milieu de congélation
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation.
- Conditions de stockage
Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.
- Conditions de livraison
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
07Aspects juridiques et sécurité
- Consignes de sécurité
- Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.
- Garantie
Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit
Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie
- Un accord de transfert de matériel est requis
- Oui