Ir al contenido
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24
Pañuelo de papel
Cérvix
Enfermedad
Adenocarcinoma cervical (origen HeLa); transfectado de forma estable con GFP-EB3 (reportero del extremo positivo de los microtúbulos)

Documentos

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24

Cell line · Número de producto 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 es un derivado genéticamente modificado de la línea celular humana HeLa de carcinoma cervical, diseñado para expresar de forma estable una proteína EB3 marcada con GFP (e...

€800.00sin impuestos ni gastos de envío

Personalización / Recomendaciones

En stock
Lote
Recomendado (lote más fresco)
  • CoA
1

01Información general

Descripción

HeLa EB3-GFP Kirc 14 es un derivado genéticamente modificado de la línea celular humana HeLa de carcinoma cervical, diseñado para expresar de forma estable un constructo de fusión de EB3 (proteína de unión a extremos 3) marcado con GFP, con «Kirc 14» denota un subclon específico (clon 14) seleccionado del conjunto de células transfectadas. La EB3 es un miembro de la familia de proteínas de unión a los extremos que sigue los extremos positivos de los microtúbulos en crecimiento y sirve como marcador del comportamiento dinámico de los microtúbulos en células vivas. La proteína de fusión GFP-EB3 produce señales fluorescentes características con forma de cometa en las puntas de los microtúbulos en polimerización, lo que permite la obtención de imágenes en células vivas de la dinámica de los microtúbulos, el transporte intracelular y la organización del citoesqueleto en tiempo real.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 se utiliza en la investigación en biología celular para la obtención de imágenes de células vivas de la dinámica del extremo positivo de los microtúbulos, estudios sobre el ensamblaje del huso mitótico y las interacciones entre los cinetocoros y los microtúbulos, investigaciones sobre el transporte de carga intracelular y la evaluación de compuestos que afectan a la dinámica de la polimerización de los microtúbulos. La expresión subclonal estable de GFP-EB3 proporciona una intensidad y un patrón de fluorescencia uniformes a lo largo de los pases, lo que hace que el clon 14 sea adecuado para ensayos de imagen cuantitativa y cribado de alto rendimiento de agentes dirigidos a los microtúbulos.

Pañuelo de papel
Cérvix
Enfermedad
Adenocarcinoma cervical (origen HeLa); transfectado de forma estable con GFP-EB3 (reportero del extremo positivo de los microtúbulos)
Aplicaciones
Imágenes de la dinámica de los microtúbulos en células vivas; estudios del huso mitótico; investigación sobre la interacción entre los cinetocoros y los microtúbulos; transporte intracelular; cribado de fármacos dirigidos a los microtúbulos

02Clasificación

Organismo
Humano
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliales
Tiempo de duplicación
aprox. 24 horas

04Identificadores

Referencia
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (número de catálogo de Cytion 305718)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase, 10 min, 37 °C
Subcultivo
Retira el medio antiguo de las células adheridas y lávalas con PBS. Cúbrelas con Accutase, incúbalas a temperatura ambiente durante 8-10 minutos, resuspendelas en medio, centrifúgalas a 300×g durante 3 minutos y transfiérelas a frascos nuevos con medio de selección.
Relación de división
Del 1 al 5
Densidad de siembra
De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Control de calidad y criopreservación

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos medio de crecimiento completo + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.