
- Pañuelo de papel
- Cérvix
- Enfermedad
- Adenocarcinoma cervical (origen HeLa); transfectado de forma estable con GFP-EB3 (reportero del extremo positivo de los microtúbulos)
Documentos
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24
Cell line · Número de producto 305718
HeLa EB3-GFP Kirc 14 es un derivado genéticamente modificado de la línea celular humana HeLa de carcinoma cervical, diseñado para expresar de forma estable una proteína EB3 marcada con GFP (e...
Personalización / Recomendaciones
- HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24Cell line€800.00
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01Información general
- Descripción
HeLa EB3-GFP Kirc 14 es un derivado genéticamente modificado de la línea celular humana HeLa de carcinoma cervical, diseñado para expresar de forma estable un constructo de fusión de EB3 (proteína de unión a extremos 3) marcado con GFP, con «Kirc 14» denota un subclon específico (clon 14) seleccionado del conjunto de células transfectadas. La EB3 es un miembro de la familia de proteínas de unión a los extremos que sigue los extremos positivos de los microtúbulos en crecimiento y sirve como marcador del comportamiento dinámico de los microtúbulos en células vivas. La proteína de fusión GFP-EB3 produce señales fluorescentes características con forma de cometa en las puntas de los microtúbulos en polimerización, lo que permite la obtención de imágenes en células vivas de la dinámica de los microtúbulos, el transporte intracelular y la organización del citoesqueleto en tiempo real.
HeLa EB3-GFP Kirc 14 se utiliza en la investigación en biología celular para la obtención de imágenes de células vivas de la dinámica del extremo positivo de los microtúbulos, estudios sobre el ensamblaje del huso mitótico y las interacciones entre los cinetocoros y los microtúbulos, investigaciones sobre el transporte de carga intracelular y la evaluación de compuestos que afectan a la dinámica de la polimerización de los microtúbulos. La expresión subclonal estable de GFP-EB3 proporciona una intensidad y un patrón de fluorescencia uniformes a lo largo de los pases, lo que hace que el clon 14 sea adecuado para ensayos de imagen cuantitativa y cribado de alto rendimiento de agentes dirigidos a los microtúbulos.
- Pañuelo de papel
- Cérvix
- Enfermedad
- Adenocarcinoma cervical (origen HeLa); transfectado de forma estable con GFP-EB3 (reportero del extremo positivo de los microtúbulos)
- Aplicaciones
- Imágenes de la dinámica de los microtúbulos en células vivas; estudios del huso mitótico; investigación sobre la interacción entre los cinetocoros y los microtúbulos; transporte intracelular; cribado de fármacos dirigidos a los microtúbulos
02Clasificación
- Organismo
- Humano
- Propiedades de crecimiento
- Adherente
- Situación respecto a los OMG
- GMO-S1
- Detalles sobre la presencia de OMG
- GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Nivel de bioseguridad
- 1
03Características
- Morfología
- De tipo epitelial
- Tipo de célula
- Células epiteliales
- Tiempo de duplicación
- aprox. 24 horas
04Identificadores
- Referencia
- HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (número de catálogo de Cytion 305718)
- N.º de identificación fiscal del NCBI
- 9606
05Manejo y cultivo
- Medio de cultivo
- DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
- Atmósfera de incubación
37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.
- Suplementos
- Complementar el medio con un 10% de FBS
- Reactivo de disociación
- Accutase, 10 min, 37 °C
- Subcultivo
- Retira el medio antiguo de las células adheridas y lávalas con PBS. Cúbrelas con Accutase, incúbalas a temperatura ambiente durante 8-10 minutos, resuspendelas en medio, centrifúgalas a 300×g durante 3 minutos y transfiérelas a frascos nuevos con medio de selección.
- Relación de división
- Del 1 al 5
- Densidad de siembra
- De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
- Renovación de fluidos
- de 2 a 3 veces por semana
- Descongelación y cultivo
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Control de calidad y criopreservación
- Medio de congelación
- Como medio de criopreservación, utilizamos medio de crecimiento completo + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación.
- Condiciones de almacenamiento
Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.
- Condiciones de envío
Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.
07Aspectos legales y de seguridad
- Medidas de seguridad
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su futura descongelación, es obligatorio cumplir estrictas medidas de seguridad. Es esencial utilizar guantes y ropa de protección adecuados, así como una mascarilla o gafas de seguridad durante el traslado de muestras congeladas desde o hacia el tanque de nitrógeno líquido. Con ello se pretende mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones crioviales al extraerlas, que pueden dar lugar a la proyección de fragmentos afilados.
- Garantía
En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto
Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía
- Se requiere un acuerdo de transferencia de material
- Sí