
- Tissue
- צוואר הרחם
- Disease
- אדנוקרצינומה צוואר הרחם (על רקע תאי HeLa); שעברה טרנספקציה יציבה עם GFP-EB3 (סמן לקצה החיובי של המיקרוטובולים)
Documents
HeLa EB3-GFP Kirc 14 09/27/24
Cell line · Product number 305718
HeLa EB3-GFP Kirc 14 is a genetically modified derivative of the human HeLa cervical carcinoma cell line, engineered to stably express a GFP-tagged EB3 (e...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
HeLa EB3-GFP Kirc 14 הוא נגזרת מהונדסת גנטית של קו התאים האנושי HeLa של קרצינומה צוואר הרחם, שהונדסה כדי לבטא באופן יציב קונסטרוקט מיזוג של EB3 (חלבון קישור קצה 3) המסומן ב-GFP, כאשר "Kirc 14" מציין תת-שיבוט ספציפי (שיבוט 14) שנבחר מתוך מאגר התאים שעברו טרנספקציה. EB3 הוא חבר במשפחת חלבוני הקישור לקצה (end-binding proteins), העוקב אחר קצות הפלוס של המיקרוטובולים הצומחים ומשמש כמדד להתנהגות הדינמית של המיקרוטובולים בתאים חיים. חלבון ההיתוך GFP-EB3 מייצר אותות פלואורסצנטיים אופייניים דמויי כוכב שביט בקצות המיקרוטובולים המתארגנים, ומאפשר הדמיה של תאים חיים המציגה את הדינמיקה של המיקרוטובולים, את ההובלה התאית ואת ארגון שלד התא בזמן אמת.
HeLa EB3-GFP Kirc 14 משמש במחקר בביולוגיה תאית להדמיה של דינמיקת הקצה החיובי של המיקרוטובולים בתאים חיים, למחקרים על הרכבת ציר המיטוזה ואינטראקציות בין קינטוכור למיקרוטובולים, לחקירת הובלת מטען תאי, ולהערכת תרכובות המשפיעות על דינמיקת הפולימריזציה של המיקרוטובולים. הביטוי היציב של GFP-EB3 בתת-קלונה מספק עוצמת דפוס פלואורסצנטיים עקביים לאורך מחזורי תרבית, מה שהופך את הקלונה 14 למתאימה לניסויי הדמיה כמותיים ולסינון בתפוקה גבוהה של חומרים המכוונים למיקרוטובולים.
- Tissue
- צוואר הרחם
- Disease
- אדנוקרצינומה צוואר הרחם (על רקע תאי HeLa); שעברה טרנספקציה יציבה עם GFP-EB3 (סמן לקצה החיובי של המיקרוטובולים)
- Applications
- הדמיה של הדינמיקה של המיקרוטובולים בתאים חיים; מחקרים על ציר המיטוזה; מחקר על האינטראקציה בין הקינטוכור למיקרוטובולים; הובלה תאיית; סינון תרופות המכוונות למיקרוטובולים
02Classification
- Organism
- Human
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Cell type
- תאי אפיתל
- Doubling time
- כ-24 שעות
04Identifiers
- Citation
- HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (מספר קטלוג Cytion 305718)
- NCBI TaxID
- 9606
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase, 10 דקות, 37°C
- Subculturing
- יש להסיר את המדיום הישן מהתאים הנצמדים ולשטוף ב-PBS. יש לכסות ב-Accutase, להשאיר באינקובטור בטמפרטורת החדר למשך 8–10 דקות, להחזיר לתמיסה עם מדיום, לסובב בצנטריפוגה ב-300×g למשך 3 דקות, ולהעביר לצלחות חדשות עם מדיום סלקציה.
- Split ratio
- 1 עד 5
- Seeding density
- 1 עד 3 × 10⁴ תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes