Skip to content
HeLa EB3-GFP Kirc 14 09/27/24
Tissue
צוואר הרחם
Disease
אדנוקרצינומה צוואר הרחם (על רקע תאי HeLa); שעברה טרנספקציה יציבה עם GFP-EB3 (סמן לקצה החיובי של המיקרוטובולים)

Documents

HeLa EB3-GFP Kirc 14 09/27/24

Cell line · Product number 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 is a genetically modified derivative of the human HeLa cervical carcinoma cell line, engineered to stably express a GFP-tagged EB3 (e...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HeLa EB3-GFP Kirc 14 הוא נגזרת מהונדסת גנטית של קו התאים האנושי HeLa של קרצינומה צוואר הרחם, שהונדסה כדי לבטא באופן יציב קונסטרוקט מיזוג של EB3 (חלבון קישור קצה 3) המסומן ב-GFP, כאשר "Kirc 14" מציין תת-שיבוט ספציפי (שיבוט 14) שנבחר מתוך מאגר התאים שעברו טרנספקציה. EB3 הוא חבר במשפחת חלבוני הקישור לקצה (end-binding proteins), העוקב אחר קצות הפלוס של המיקרוטובולים הצומחים ומשמש כמדד להתנהגות הדינמית של המיקרוטובולים בתאים חיים. חלבון ההיתוך GFP-EB3 מייצר אותות פלואורסצנטיים אופייניים דמויי כוכב שביט בקצות המיקרוטובולים המתארגנים, ומאפשר הדמיה של תאים חיים המציגה את הדינמיקה של המיקרוטובולים, את ההובלה התאית ואת ארגון שלד התא בזמן אמת.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 משמש במחקר בביולוגיה תאית להדמיה של דינמיקת הקצה החיובי של המיקרוטובולים בתאים חיים, למחקרים על הרכבת ציר המיטוזה ואינטראקציות בין קינטוכור למיקרוטובולים, לחקירת הובלת מטען תאי, ולהערכת תרכובות המשפיעות על דינמיקת הפולימריזציה של המיקרוטובולים. הביטוי היציב של GFP-EB3 בתת-קלונה מספק עוצמת דפוס פלואורסצנטיים עקביים לאורך מחזורי תרבית, מה שהופך את הקלונה 14 למתאימה לניסויי הדמיה כמותיים ולסינון בתפוקה גבוהה של חומרים המכוונים למיקרוטובולים.

Tissue
צוואר הרחם
Disease
אדנוקרצינומה צוואר הרחם (על רקע תאי HeLa); שעברה טרנספקציה יציבה עם GFP-EB3 (סמן לקצה החיובי של המיקרוטובולים)
Applications
הדמיה של הדינמיקה של המיקרוטובולים בתאים חיים; מחקרים על ציר המיטוזה; מחקר על האינטראקציה בין הקינטוכור למיקרוטובולים; הובלה תאיית; סינון תרופות המכוונות למיקרוטובולים

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תאי אפיתל
Doubling time
כ-24 שעות

04Identifiers

Citation
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (מספר קטלוג Cytion 305718)
NCBI TaxID
9606

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
Accutase, 10 דקות, 37°C
Subculturing
יש להסיר את המדיום הישן מהתאים הנצמדים ולשטוף ב-PBS. יש לכסות ב-Accutase, להשאיר באינקובטור בטמפרטורת החדר למשך 8–10 דקות, להחזיר לתמיסה עם מדיום, לסובב בצנטריפוגה ב-300×g למשך 3 דקות, ולהעביר לצלחות חדשות עם מדיום סלקציה.
Split ratio
1 עד 5
Seeding density
1 עד 3 × 10⁴ תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Quality control and cryopreservation

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.