Gå direkte til indholdet
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24
Væv
Livmoderhalsen
Sygdom
Adenokarcinom i livmoderhalsen (HeLa-baggrund); stabilt transfekteret med GFP-EB3 (reporter for mikrotubulernes plus-ende)

Dokumenter

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24

Cell line · Varenummer 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 er et genetisk modificeret afledt produkt af den humane HeLa-cellekultur fra livmoderhalskræft, der er udviklet til stabilt at udtrykke et GFP-mærket EB3 (e...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HeLa EB3-GFP Kirc 14 er et genetisk modificeret derivat af den humane HeLa-cellekultur fra livmoderhalskræft, der er udviklet til stabilt at udtrykke et GFP-mærket EB3-fusionskonstrukt (end-binding protein 3), hvor hvor »Kirc 14« betegner en specifik subklon (klon 14), der er udvalgt fra den transfekterede pulje. EB3 tilhører familien af end-binding-proteiner, som sporer de voksende plus-ender af mikrotubuli og fungerer som en markør for mikrotubuliens dynamiske adfærd i levende celler. GFP-EB3-fusionsproteinet producerer karakteristiske kometlignende fluorescenssignaler ved spidserne af polymeriserende mikrotubuli, hvilket muliggør billeddannelse af levende celler med hensyn til mikrotubuli-dynamik, intracellulær transport og cytoskeletets organisation i realtid.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 anvendes i cellebiologisk forskning til billeddannelse af levende celler med henblik på at studere dynamikken i mikrotubulernes plus-ender, undersøgelser af mitotisk spindelsamling og interaktioner mellem kinetokorer og mikrotubuli, undersøgelser af intracellulær transport af last samt evaluering af forbindelser, der påvirker dynamikken i mikrotubulipolymerisationen. Den stabile subklonale GFP-EB3-ekspression giver en ensartet fluorescensintensitet og -mønster på tværs af passager, hvilket gør klon 14 velegnet til kvantitative billeddannelsesanalyser og højkapacitetsscreening af midler, der er rettet mod mikrotubuli.

Væv
Livmoderhalsen
Sygdom
Adenokarcinom i livmoderhalsen (HeLa-baggrund); stabilt transfekteret med GFP-EB3 (reporter for mikrotubulernes plus-ende)
Anvendelser
Billeddannelse af mikrotubuli-dynamik i levende celler; undersøgelser af mitotiske spindler; forskning i interaktionen mellem kinetokorer og mikrotubuli; intracellulær transport; screening af lægemidler rettet mod mikrotubuli

02Klassificering

Organisme
Menneske
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitheliale celler
Fordoblingstid
ca. 24 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24 (Cytion-katalognummer 305718)
NCBI-skattenummer
9606

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase, 10 min., 37 °C
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de vedhæftede celler og vask dem med PBS. Dæk cellerne med Accutase, inkuber ved stuetemperatur i 8–10 minutter, resuspender med medium, centrifuger ved 300×g i 3 minutter, og overfør til nye kolber med selektionsmedium.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.