Tartalomra ugrás
HeLa EB3-GFP Kirc 14 2024. szeptember 27.
Szövet
Cervix
Betegség
Méhnyak-adenokarcinóma (HeLa-háttér); GFP-EB3-mal stabilan transzfektálva (mikrotubulus plusz-végű riporter)

Dokumentumok

HeLa EB3-GFP Kirc 14 2024. szeptember 27.

Cell line · Termékszám 305718

A HeLa EB3-GFP Kirc 14 az emberi HeLa méhnyakrákos sejtvonal genetikailag módosított származéka, amelyet úgy alakítottak ki, hogy stabilan kifejezze a GFP-vel jelölt EB3-at (e...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HeLa EB3-GFP Kirc 14 az emberi HeLa méhnyakrákos sejtvonal genetikailag módosított származéka, amelyet úgy alakítottak ki, hogy stabilan kifejezze a GFP-vel jelölt EB3 (end-binding protein 3) fúziós konstrukciót, ahol ahol a „Kirc 14” a transzfektált sejtállományból kiválasztott specifikus szubklónt (14. klón) jelöli. Az EB3 az end-binding fehérje család tagja, amely a növekvő mikrotubulusok plusz-végét követi nyomon, és az élő sejtekben a mikrotubulusok dinamikus viselkedésének jelzőjeként szolgál. A GFP-EB3 fúziós fehérje jellegzetes, üstökösszerű fluoreszcens jeleket hoz létre a polimerizálódó mikrotubulusok csúcsain, lehetővé téve a mikrotubulusok dinamikájának, az intracelluláris transzportnak és a citoszkeleton szerveződésének valós idejű, élő sejtekben történő képalkotását.

A HeLa EB3-GFP Kirc 14-et a sejtbiológiai kutatásokban használják a mikrotubulusok plusz-végének dinamikájának élő sejtekben történő képalkotására, a mitotikus orsó összeállásának és a kinetokór–mikrotubulus kölcsönhatások vizsgálatára, az intracelluláris szállítás kutatására, valamint a mikrotubulus-polimerizációs dinamikát befolyásoló vegyületek értékelésére. A stabil szubklonális GFP-EB3-expresszió a tenyésztési ciklusok során is állandó fluoreszcencia-intenzitást és -mintázatot biztosít, így a 14-es klón alkalmas kvantitatív képalkotó vizsgálatokra és a mikrotubulusokat célzó hatóanyagok nagy áteresztőképességű szűrésére.

Szövet
Cervix
Betegség
Méhnyak-adenokarcinóma (HeLa-háttér); GFP-EB3-mal stabilan transzfektálva (mikrotubulus plusz-végű riporter)
Alkalmazások
Élő sejtek mikrotubulus-dinamikájának képalkotása; mitotikus orsó vizsgálata; kinetokór–mikrotubulus kölcsönhatás kutatása; sejten belüli transzport; mikrotubulusokat célzó gyógyszerek szűrése

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epithel sejtek
Kettőzési idő
kb. 24 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
HeLa EB3-GFP Kirc 14 2024.09.27. (Cytion katalógusszám: 305718)
NCBI adóazonosító szám
9606

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase, 10 perc, 37 °C
Átültetés
Távolítsuk el a régi táptalajt a tapadó sejtekről, majd mossuk le PBS-sel. Öntsünk rá Accutase-t, inkubáljuk szobahőmérsékleten 8–10 percig, oldjuk fel újra táptalajban, centrifugáljuk 300×g-nél 3 percig, majd helyezzük át friss, szelekciós táptalajjal ellátott lombikokba.
Osztási arány
1–5
Ültetési sűrűség
1–3 × 10⁴ sejt/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.