Gå direkt till innehållet
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24
Vävnad
Cervix
Sjukdom
Adenokarcinom i livmoderhalsen (HeLa-bakgrund); stabilt transfekterat med GFP-EB3 (reporter för mikrotubulernas plus-ände)

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24

Cell line · Produktnummer 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 är en genetiskt modifierad variant av den humana cellinjen HeLa, som härstammar från livmoderhalscancer, och som har konstruerats för att stabilt uttrycka ett GFP-märkt EB3 (e...

€800.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

HeLa EB3-GFP Kirc 14 är en genetiskt modifierad variant av den humana livmoderhalscancercellinjen HeLa, som har konstruerats för att stabilt uttrycka en GFP-märkt EB3-fusionskonstruktion (end-binding protein 3), där ”Kirc 14” betecknar en specifik subklon (klon 14) som valts ut från den transfekterade populationen. EB3 tillhör familjen av end-bindande proteiner som följer de växande plus-ändarna av mikrotubuli och fungerar som en markör för mikrotubulernas dynamiska beteende i levande celler. GFP-EB3-fusionsproteinet ger upphov till karakteristiska kometliknande fluorescerande signaler vid spetsarna på polymeriserande mikrotubuli, vilket möjliggör avbildning av mikrotubulidynamik, intracellulär transport och cytoskelettets organisation i levande celler i realtid.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 används inom cellbiologisk forskning för avbildning av mikrotubulernas plusändsdynamik i levande celler, studier av mitotisk spindelbildning och interaktioner mellan kinetokorer och mikrotubuli, undersökningar av intracellulär transport av last samt utvärdering av föreningar som påverkar mikrotubulernas polymerisationsdynamik. Det stabila subklonala GFP-EB3-uttrycket ger en jämn fluorescensintensitet och ett jämnt mönster över flera passager, vilket gör klon 14 lämplig för kvantitativa avbildningsanalyser och högkapacitetsscreening av ämnen som riktar sig mot mikrotubuli.

Vävnad
Cervix
Sjukdom
Adenokarcinom i livmoderhalsen (HeLa-bakgrund); stabilt transfekterat med GFP-EB3 (reporter för mikrotubulernas plus-ände)
Ansökningar
Avbildning av mikrotubulernas dynamik i levande celler; studier av mitotiska spindlar; forskning om interaktionen mellan kinetokorer och mikrotubuler; intracellulär transport; screening av läkemedel riktade mot mikrotubuler

02Klassificering

Organism
Människa
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Epiteliala celler
Fördubblingstid
ca 24 timmar

04Identifierare

Källa
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (Cytion-katalognummer 305718)
NCBI-skattenummer
9606

05Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase, 10 min., 37 °C
Vidareodling
Avlägsna det gamla odlingsmediet från de vidhäftade cellerna och skölj med PBS. Täck med Accutase, inkubera vid rumstemperatur i 8–10 minuter, resuspendera med odlingsmedium, centrifugera vid 300×g i 3 minuter och överför till nya kolvar med selektionsmedium.
Uppdelningsförhållande
1 till 5
Såtäthet
1 till 3 × 10⁴ celler/cm²
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Frysmedel
Som kryopreserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.