Mine otse sisu juurde
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24
Kude
Emakakael
Haigus
Emakakaela adenokartsinoom (HeLa-taust); stabiilselt transfekteeritud GFP-EB3-ga (mikrotubulite pluss-otsa reporter)

Dokumendid

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24

Cell line · Toote number 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 on inimese HeLa emakakaelavähi rakuliini geneetiliselt muundatud derivaat, mis on loodud GFP-märgistatud EB3 stabiilseks ekspresseerimiseks (e...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HeLa EB3-GFP Kirc 14 on inimese HeLa emakakaelavähi rakuliini geneetiliselt muundatud derivaat, mis on loodud GFP-märgistatud EB3 (end-binding protein 3) fusioonikonstrukti stabiilseks ekspresseerimiseks, kusjuures kus „Kirc 14“ tähistab transfekteeritud rakupoolist valitud spetsiifilist alaklooni (kloon 14). EB3 kuulub otsasiduvate valkude perekonda, mis jälgib kasvavate mikrotubulite pluss-otsi ja toimib elusrakkudes mikrotubulite dünaamilise käitumise indikaatorina. GFP-EB3-fusioonvalk tekitab polümeriseeruvate mikrotubulite otstes iseloomulikke komeedilaadseid fluorestsentssignaale, võimaldades reaalajas jälgida elusrakkudes mikrotubulite dünaamikat, rakusisest transporti ja tsütoskeleti korraldust.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 kasutatakse rakubioloogia uuringutes mikrotubulite pluss-otste dünaamika pildistamiseks elusrakkudes, mitootilise varda moodustumise ja kinetokoor-mikrotubuli interaktsioonide uurimiseks, rakusisese lasti transpordi uurimiseks ning mikrotubulite polümerisatsiooni dünaamikat mõjutavate ühendite hindamiseks. Stabiilne subklooniline GFP-EB3 ekspressioon tagab ühtlase fluorestsentsi intensiivsuse ja mustri kõikide passaažide vältel, mistõttu on kloon 14 sobiv kvantitatiivseteks pildistamisanalüüsideks ja mikrotubuleid sihtivate ainete suure läbilaskevõimega sõelumiseks.

Kude
Emakakael
Haigus
Emakakaela adenokartsinoom (HeLa-taust); stabiilselt transfekteeritud GFP-EB3-ga (mikrotubulite pluss-otsa reporter)
Rakendused
Elusrakkude mikrotubulite dünaamika pildistamine; mitootilise varda uuringud; kinetokooride ja mikrotubulite vastastikmõju uurimine; rakusisene transport; mikrotubulitele suunatud ravimite sõelumine

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakud
Kahekordistumisaeg
umbes 24 tundi

04Tunnused

Viide
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24 (Cytioni katalooginumber 305718)
NCBI maksukood
9606

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase, 10 min, 37 °C
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage vanad kasvukeskkonnad kinnitunud rakkudelt ja peske neid PBS-ga. Katke Accutase’iga, inkubeerige toatemperatuuril 8–10 minutit, suspendeerige uuesti kasvukeskkonnas, tsentrifuugige 300×g juures 3 minutit ja kandke üle värsketesse kolvidesse, mis sisaldavad selektsioonikeskkonda.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
1–3 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.