Přejít na obsah
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27. 9. 2024
Tkáň
Cervix
Nemoc
Adenokarcinom děložního čípku (na pozadí buněk HeLa); stabilně transfekovaný genem GFP-EB3 (reporter pro plusový konec mikrotubulů)

Dokumenty

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27. 9. 2024

Cell line · Číslo výrobku 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 je geneticky modifikovaný derivát lidské buněčné linie HeLa pocházející z karcinomu děložního čípku, který byl upraven tak, aby stabilně exprimoval EB3 značený GFP (e...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

HeLa EB3-GFP Kirc 14 je geneticky modifikovaný derivát lidské buněčné linie HeLa pocházející z karcinomu děložního čípku, který byl upraven tak, aby stabilně exprimoval fúzní konstrukt EB3 (end-binding protein 3) značený GFP, přičemž „Kirc 14“ označuje specifický subklon (klon 14) vybraný z transfekovaného souboru. EB3 patří do rodiny end-binding proteinů, které sledují plusové konce rostoucích mikrotubulů a slouží jako indikátor dynamického chování mikrotubulů v živých buňkách. Fúzní protein GFP-EB3 vytváří charakteristické fluorescenční signály připomínající komety na koncích polymerizujících mikrotubulů, což umožňuje zobrazování dynamiky mikrotubulů, intracelulárního transportu a organizace cytoskeletu v živých buňkách v reálném čase.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 se používá ve výzkumu buněčné biologie pro zobrazování dynamiky plusových konců mikrotubulů v živých buňkách, pro studium sestavování mitotického vřetena a interakcí mezi kinetochory a mikrotubuly, pro výzkum transportu intracelulárního nákladu a pro hodnocení sloučenin, které ovlivňují dynamiku polymerizace mikrotubulů. Stabilní subklonální exprese GFP-EB3 zajišťuje konzistentní intenzitu a vzorec fluorescence napříč pasážemi, díky čemuž je klon 14 vhodný pro kvantitativní zobrazovací testy a vysoce výkonné screeningové testy látek zaměřených na mikrotubuly.

Tkáň
Cervix
Nemoc
Adenokarcinom děložního čípku (na pozadí buněk HeLa); stabilně transfekovaný genem GFP-EB3 (reporter pro plusový konec mikrotubulů)
Aplikace
Zobrazování dynamiky mikrotubulů v živých buňkách; studie mitotického vřetena; výzkum interakce kinetochorů a mikrotubulů; intracelulární transport; screening léčiv zaměřených na mikrotubuly

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelové buňky
Doba zdvojnásobení
cca 24 hodin

04Identifikátory

Citace
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27. 9. 2024 (katalogové číslo Cytion 305718)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase, 10 min., 37 °C
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adhezivních buněk a propláchněte je PBS. Přidejte Accutase, inkubujte při pokojové teplotě po dobu 8–10 minut, resuspendujte v médiu, odstřeďte při 300×g po dobu 3 minut a přeneste do nových lahví se selekčním médiem.
Poměr rozdělení
1 až 5
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buněk/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.