İçeriğe atla
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24
Doku
Serviks
Hastalık
Servikal adenokarsinom (HeLa kökenli); GFP-EB3 (mikrotübül artı ucu raportörü) ile kalıcı olarak transfekte edilmiş

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24

Cell line · Ürün numarası 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14, insan HeLa servikal karsinom hücre hattının genetik olarak değiştirilmiş bir türevidir ve GFP etiketli EB3’ü (e...) istikrarlı bir şekilde eksprese edecek şekilde tasarlanmıştır...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HeLa EB3-GFP Kirc 14, insan HeLa servikal karsinom hücre hattının genetik olarak modifiye edilmiş bir türevidir ve GFP etiketli bir EB3 (uç bağlanma proteini 3) füzyon yapısını istikrarlı bir şekilde eksprese edecek şekilde tasarlanmıştır; burada "Kirc 14" ise transfekte edilmiş havuzdan seçilen spesifik bir alt klonu (klon 14) ifade eder. EB3, büyüyen mikrotübülün artı uçlarını takip eden ve canlı hücrelerde dinamik mikrotübül davranışının bir göstergesi olarak işlev gören uç bağlayıcı protein ailesinin bir üyesidir. GFP-EB3 füzyon proteini, polimerize olan mikrotübül uçlarında karakteristik kuyruklu yıldız benzeri floresan sinyaller üretir ve bu sayede mikrotübül dinamiği, hücre içi taşıma ve sitoskeletal organizasyonun canlı hücre görüntülemesi gerçek zamanlı olarak gerçekleştirilebilir.

HeLa EB3-GFP Kirc 14, hücre biyolojisi araştırmalarında mikrotübül artı uç dinamiklerinin canlı hücre görüntülemesi, mitotik iğ oluşumu ve kinetokor-mikrotübül etkileşimleri üzerine çalışmalar, hücre içi yük taşınımının araştırılması ve mikrotübül polimerizasyon dinamiklerini etkileyen bileşiklerin değerlendirilmesi amacıyla kullanılır. Kararlı subklonal GFP-EB3 ekspresyonu, pasajlar boyunca tutarlı bir floresan yoğunluğu ve paterni sağlar; bu da klon 14'ü kantitatif görüntüleme analizleri ve mikrotübül hedefli ajanların yüksek verimli taraması için uygun hale getirir.

Doku
Serviks
Hastalık
Servikal adenokarsinom (HeLa kökenli); GFP-EB3 (mikrotübül artı ucu raportörü) ile kalıcı olarak transfekte edilmiş
Uygulamalar
Canlı hücrelerde mikrotübül dinamiği görüntüleme; mitotik iğ çalışmaları; kinetokor-mikrotübül etkileşimi araştırmaları; hücre içi taşıma; mikrotübülü hedef alan ilaç taraması

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Epitel hücreleri
İki katına çıkma süresi
yaklaşık 24 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24 (Cytion katalog numarası 305718)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase, 10 dakika, 37°C
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski besiyerini çıkarın ve PBS ile yıkayın. Accutase ekleyin, oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübe edin, besiyeri ile yeniden süspansiyon haline getirin, 300×g’de 3 dakika santrifüjleyin ve seçici besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 5'e kadar
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 × 10⁴ hücre/cm²
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.