
- Doku
- Serviks
- Hastalık
- Servikal adenokarsinom (HeLa kökenli); GFP-EB3 (mikrotübül artı ucu raportörü) ile kalıcı olarak transfekte edilmiş
Belgeler
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24
Cell line · Ürün numarası 305718
HeLa EB3-GFP Kirc 14, insan HeLa servikal karsinom hücre hattının genetik olarak değiştirilmiş bir türevidir ve GFP etiketli EB3’ü (e...) istikrarlı bir şekilde eksprese edecek şekilde tasarlanmıştır...
Kişiselleştirme / Öneriler
- HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24Cell line€800.00
Önerilen (en taze parti)
01Genel bilgiler
- Açıklama
HeLa EB3-GFP Kirc 14, insan HeLa servikal karsinom hücre hattının genetik olarak modifiye edilmiş bir türevidir ve GFP etiketli bir EB3 (uç bağlanma proteini 3) füzyon yapısını istikrarlı bir şekilde eksprese edecek şekilde tasarlanmıştır; burada "Kirc 14" ise transfekte edilmiş havuzdan seçilen spesifik bir alt klonu (klon 14) ifade eder. EB3, büyüyen mikrotübülün artı uçlarını takip eden ve canlı hücrelerde dinamik mikrotübül davranışının bir göstergesi olarak işlev gören uç bağlayıcı protein ailesinin bir üyesidir. GFP-EB3 füzyon proteini, polimerize olan mikrotübül uçlarında karakteristik kuyruklu yıldız benzeri floresan sinyaller üretir ve bu sayede mikrotübül dinamiği, hücre içi taşıma ve sitoskeletal organizasyonun canlı hücre görüntülemesi gerçek zamanlı olarak gerçekleştirilebilir.
HeLa EB3-GFP Kirc 14, hücre biyolojisi araştırmalarında mikrotübül artı uç dinamiklerinin canlı hücre görüntülemesi, mitotik iğ oluşumu ve kinetokor-mikrotübül etkileşimleri üzerine çalışmalar, hücre içi yük taşınımının araştırılması ve mikrotübül polimerizasyon dinamiklerini etkileyen bileşiklerin değerlendirilmesi amacıyla kullanılır. Kararlı subklonal GFP-EB3 ekspresyonu, pasajlar boyunca tutarlı bir floresan yoğunluğu ve paterni sağlar; bu da klon 14'ü kantitatif görüntüleme analizleri ve mikrotübül hedefli ajanların yüksek verimli taraması için uygun hale getirir.
- Doku
- Serviks
- Hastalık
- Servikal adenokarsinom (HeLa kökenli); GFP-EB3 (mikrotübül artı ucu raportörü) ile kalıcı olarak transfekte edilmiş
- Uygulamalar
- Canlı hücrelerde mikrotübül dinamiği görüntüleme; mitotik iğ çalışmaları; kinetokor-mikrotübül etkileşimi araştırmaları; hücre içi taşıma; mikrotübülü hedef alan ilaç taraması
02Sınıflandırma
- Canlı
- İnsan
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- GDO durumu
- GMO-S1
- GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
- GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Özellikler
- Morfoloji
- Epitel benzeri
- Hücre türü
- Epitel hücreleri
- İki katına çıkma süresi
- yaklaşık 24 saat
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24 (Cytion katalog numarası 305718)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 9606
05İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %10 FBS ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase, 10 dakika, 37°C
- Alt kültür oluşturma
- Yapışık hücrelerden eski besiyerini çıkarın ve PBS ile yıkayın. Accutase ekleyin, oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübe edin, besiyeri ile yeniden süspansiyon haline getirin, 300×g’de 3 dakika santrifüjleyin ve seçici besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
- Bölünme oranı
- 1'den 5'e kadar
- Ekim yoğunluğu
- 1 ila 3 × 10⁴ hücre/cm²
- Sıvı değişimi
- haftada 2 ila 3 kez
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
07Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Malzeme Transfer Anlaşması gereklidir
- Evet