Prejsť na obsah
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27. 9. 2024
Tkanivo
Cervix
Choroba
Adenokarcinóm krčka maternice (na pozadí HeLa); stabilne transfekovaný GFP-EB3 (reporter plus-konca mikrotubulov)

Dokumenty

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27. 9. 2024

Cell line · Číslo výrobku 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 je geneticky modifikovaný derivát ľudskej bunkovej línie HeLa pochádzajúcej z karcinómu krčka maternice, ktorý bol geneticky upravený tak, aby stabilne exprimoval proteín EB3 označený GFP (e...

€800.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

HeLa EB3-GFP Kirc 14 je geneticky modifikovaný derivát ľudskej bunkovej línie HeLa pochádzajúcej z karcinómu krčka maternice, ktorý bol vytvorený tak, aby stabilne exprimoval fúzny konštrukt EB3 (end-binding protein 3) označený GFP, pričom „Kirc 14“ označuje špecifický subklon (klon 14) vybraný z transfekovaného súboru. EB3 patrí do rodiny end-binding proteínov, ktoré sledujú rastúce plusové konce mikrotubulov a slúžia ako indikátor dynamického správania mikrotubulov v živých bunkách. Fúzny proteín GFP-EB3 produkuje charakteristické fluorescenčné signály pripomínajúce kométy na koncoch polymerizujúcich mikrotubulov, čo umožňuje zobrazovanie dynamiky mikrotubulov, intracelulárneho transportu a organizácie cytoskeletu v živých bunkách v reálnom čase.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 sa používa vo výskume bunkovej biológie na zobrazovanie dynamiky plusových koncov mikrotubulov v živých bunkách, na štúdium zostavovania mitotického vretena a interakcií medzi kinetochórom a mikrotubulmi, na skúmanie intracelulárneho transportu nákladu a na hodnotenie zlúčenín, ktoré ovplyvňujú dynamiku polymerizácie mikrotubulov. Stabilná subklonálna expresia GFP-EB3 zabezpečuje konzistentnú intenzitu a vzor fluorescencie v priebehu pasáží, vďaka čomu je klon 14 vhodný na kvantitatívne zobrazovacie testy a vysokokapacitné skríningové testy látok zameraných na mikrotubuly.

Tkanivo
Cervix
Choroba
Adenokarcinóm krčka maternice (na pozadí HeLa); stabilne transfekovaný GFP-EB3 (reporter plus-konca mikrotubulov)
Aplikácie
Zobrazovanie dynamiky mikrotubulov v živých bunkách; štúdium mitotického vretena; výskum interakcie kinetochórov a mikrotubulov; intracelulárny transport; skríning liekov zameraných na mikrotubuly

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epitelové bunky
Doba zdvojnásobenia
cca 24 hodín

04Identifikátory

Citácia
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27. 9. 2024 (katalógové číslo Cytion 305718)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase, 10 min., 37 °C
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adhezívnych buniek a premyte ich PBS. Zalejte roztokom Accutase, inkubujte pri izbovej teplote 8–10 minút, resuspendujte v médiu, odstreďte pri 300×g po dobu 3 minút a preneste do čerstvých fliaš so selekčným médiom.
Pomer rozdelenia
1 až 5
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buniek/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.