Ga naar de inhoud
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27-09-24
Weefsel
Baarmoederhals
Ziekte
Adenocarcinoom van de baarmoederhals (HeLa-achtergrond); stabiel getransfecteerd met GFP-EB3 (reporter voor het plus-uiteinde van microtubuli)

Documenten

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27-09-24

Cell line · Productnummer 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 is een genetisch gemodificeerde afgeleide van de menselijke HeLa-baarmoederhalskankercellijn, die zo is ontworpen dat deze op stabiele wijze een met GFP gemerkt EB3 tot expressie brengt (e...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

HeLa EB3-GFP Kirc 14 is een genetisch gemodificeerde afgeleide van de menselijke HeLa-baarmoederhalskankercellijn, die zo is ontworpen dat deze op stabiele wijze een met GFP gemerkt EB3-fusieconstruct (end-binding protein 3) tot expressie brengt, waarbij waarbij „Kirc 14“ verwijst naar een specifieke subkloon (kloon 14) die uit de getransfecteerde pool is geselecteerd. EB3 behoort tot de familie van end-binding-eiwitten die de plus-uiteinden van groeiende microtubuli volgen en fungeert als een reporter voor het dynamische gedrag van microtubuli in levende cellen. Het GFP-EB3-fusie-eiwit produceert karakteristieke, komeetachtige fluorescerende signalen aan de uiteinden van polymeriserende microtubuli, waardoor in realtime beeldvorming van levende cellen mogelijk is met betrekking tot de dynamiek van microtubuli, intracellulair transport en de organisatie van het cytoskelet.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 wordt in celbiologisch onderzoek gebruikt voor het in levende cellen in beeld brengen van de dynamiek van de plus-uiteinden van microtubuli, voor studies naar de assemblage van de mitotische spindel en de interacties tussen kinetochoren en microtubuli, voor onderzoek naar het intracellulaire transport van lading en voor de evaluatie van verbindingen die de polymerisatiedynamiek van microtubuli beïnvloeden. De stabiele subklonale GFP-EB3-expressie zorgt voor een consistente fluorescentie-intensiteit en -patroon over verschillende passages heen, waardoor kloon 14 geschikt is voor kwantitatieve beeldvormingsassays en high-throughput-screening van middelen die zich richten op microtubuli.

Weefsel
Baarmoederhals
Ziekte
Adenocarcinoom van de baarmoederhals (HeLa-achtergrond); stabiel getransfecteerd met GFP-EB3 (reporter voor het plus-uiteinde van microtubuli)
Toepassingen
Beeldvorming van de dynamica van microtubuli in levende cellen; onderzoek naar de mitotische spindel; onderzoek naar de interactie tussen kinetochoren en microtubuli; intracellulair transport; screening van geneesmiddelen die zich richten op microtubuli

02Classificatie

Organisme
Mens
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epitheelcellen
Verdubbelingstijd
ongeveer 24 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27-09-24 (Cytion-catalogusnummer 305718)
NCBI-belastingnummer
9606

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase, 10 min., 37 °C
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de aanhechtende cellen en was ze met PBS. Bedek ze met Accutase, incubeer ze 8-10 minuten bij kamertemperatuur, breng ze opnieuw in suspensie met medium, centrifugeer ze 3 minuten bij 300×g en breng ze over naar nieuwe kweekflessen met selectiemedium.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 5
Zaaidichtheid
1 tot 3 × 10⁴ cellen/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.