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HeLa EB3-GFP Kirc 14 2024年9月27日
ティッシュ
子宮頸部
病気
子宮頸部腺がん(HeLa由来);GFP-EB3(微小管プラス端レポーター)を安定的に導入したもの

HeLa EB3-GFP Kirc 14 2024年9月27日

Cell line · 製品番号 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14は、ヒトHeLa子宮頸がん細胞株を遺伝子改変した派生株であり、GFPタグ付きEB3(e...)を安定的に発現するように設計されています。

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01概要

説明

HeLa EB3-GFP Kirc 14は、ヒトHeLa子宮頸がん細胞株を遺伝子改変した派生株であり、GFPタグ付きEB3(エンドバインディングタンパク質3)融合タンパク質を安定発現するように設計されており、 「Kirc 14」とは、トランスフェクションされたプールから選別された特定のサブクローン(クローン14)を指します。EB3はエンド結合タンパク質ファミリーの一員であり、伸長中の微小管のプラス端を追跡し、生細胞における微小管の動的な挙動を示すレポーターとして機能します。 GFP-EB3融合タンパク質は、重合中の微小管の先端で特徴的な彗星状の蛍光シグナルを発生させ、微小管の動態、細胞内輸送、および細胞骨格の組織化をリアルタイムで生細胞イメージングすることを可能にします。

HeLa EB3-GFP Kirc 14 は、細胞生物学の研究において、微小管のプラス端の動態の生細胞イメージング、有糸分裂紡錘体の形成およびキネトコアと微小管の相互作用の研究、細胞内輸送体の調査、ならびに微小管重合の動態に影響を与える化合物の評価に使用されます。 安定したサブクローンGFP-EB3の発現により、継代を超えて一貫した蛍光強度とパターンが得られるため、クローン14は定量イメージングアッセイや、微小管を標的とする薬剤のハイスループットスクリーニングに適しています。

ティッシュ
子宮頸部
病気
子宮頸部腺がん(HeLa由来);GFP-EB3(微小管プラス端レポーター)を安定的に導入したもの
用途
生細胞における微小管の動態イメージング;有糸分裂紡錘体の研究;キネトコアと微小管の相互作用に関する研究;細胞内輸送;微小管を標的とする薬剤のスクリーニング

02分類

生物
人間
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
細胞の種類
上皮細胞
倍増時間
約24時間

04識別子

引用
HeLa EB3-GFP Kirc 14 2024年9月27日 (Cytion カタログ番号 305718)
NCBI 納税者番号
9606

05取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
Accutase、10分、37°C
継代培養
付着細胞から古い培地を取り除き、PBSで洗浄する。Accutaseを添加し、室温で8~10分間インキュベートした後、培地で再懸濁し、300×gで3分間遠心分離し、選択培地を入れた新しいフラスコに移す。
分割比率
1~5
播種密度
1~3 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06品質管理と凍結保存

凍結培地
凍結保存培地としては、解凍後の生存率を十分に高めるため、完全増殖培地+10%DMSOを使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。