Pereiti prie turinio
HeLa EB3-GFP Kirc 14 2024 m. rugsėjo 27 d.
Audinys
Gimdos kaklelis
Liga
Gimdos kaklelio adenokarcinoma (HeLa fonas); stabiliai transfekuota GFP-EB3 (mikrotubulių teigiamojo galo reporteris)

Dokumentai

HeLa EB3-GFP Kirc 14 2024 m. rugsėjo 27 d.

Cell line · Prekės numeris 305718

„HeLa EB3-GFP Kirc 14“ yra genetiškai modifikuotas žmogaus gimdos kaklelio karcinomos ląstelių linijos „HeLa“ variantas, sukurtas taip, kad stabiliai ekspresuotų GFP žymėtą EB3 (e...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

„HeLa EB3-GFP Kirc 14“ yra genetiškai modifikuotas žmogaus gimdos kaklelio karcinomos ląstelių linijos „HeLa“ darinys, sukurtas taip, kad stabiliai ekspresuotų GFP žymėtą EB3 (galinio ryšio baltymo 3) junginį, kur „Kirc 14“ žymintis konkretų subkloną (kloną 14), atrinktą iš transfekuoto ląstelių pulko. EB3 priklauso galinių jungčių baltymų šeimai, kuri seka augančių mikrotubulių pliusinius galus ir veikia kaip gyvų ląstelių dinamiško mikrotubulių elgesio indikatorius. GFP-EB3 jungtinis baltymas sukuria būdingus kometos formos fluorescencinius signalus polimerizuojančių mikrotubulių galuose, leidžiančius realiuoju laiku stebėti gyvų ląstelių mikrotubulių dinamiką, intraląstelinį transportą ir citoskeleto organizavimą.

„HeLa EB3-GFP Kirc 14“ naudojamas ląstelių biologijos tyrimuose gyvų ląstelių mikrotubulių „pliuso“ galų dinamikos vaizdavimui, mitozinio verpstės surinkimo ir kinetochorų bei mikrotubulių sąveikų tyrimams, ląstelės vidaus krovinių transporto tyrimams bei junginių, veikiančių mikrotubulių polimerizacijos dinamiką, vertinimui. Stabili subkloninė GFP-EB3 ekspresija užtikrina pastovų fluorescencijos intensyvumą ir modelį per visus pasėlių kartus, todėl 14-asis klonas tinka kiekybiniams vaizdavimo tyrimams ir didelio našumo mikrotubulius veikiančių medžiagų atrankai.

Audinys
Gimdos kaklelis
Liga
Gimdos kaklelio adenokarcinoma (HeLa fonas); stabiliai transfekuota GFP-EB3 (mikrotubulių teigiamojo galo reporteris)
Paraiškos
Gyvų ląstelių mikrotubulių dinamikos vaizdinimas; mitozinio verpstės tyrimai; kinetochorų ir mikrotubulių sąveikos tyrimai; ląstelių vidinis transportas; vaistų, veikiančių mikrotubulius, atranka

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Epitelio ląstelės
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug 24 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
HeLa EB3-GFP Kirc 14 2024 m. rugsėjo 27 d. (Cytion katalogo numeris 305718)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
„Accutase“, 10 min., 37 °C
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prisitvirtinusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS tirpalu. Užpilkite „Accutase“ tirpalu, inkubuokite kambario temperatūroje 8–10 minučių, vėl suspenduokite terpėje, centrifuguokite 300×g greičiu 3 minutes ir perkelkite į šviežias kolbas su selekcijos terpe.
Skaidymo santykis
1–5
Sėjos tankis
nuo 1 iki 3 × 10⁴ ląstelių/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.