
- Tecido
- Colo do útero
- Doença
- Adenocarcinoma cervical (de origem HeLa); transfectado de forma estável com GFP-EB3 (reportero da extremidade positiva dos microtúbulos)
Documentos
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24
Cell line · Número do produto 305718
A HeLa EB3-GFP Kirc 14 é um derivado geneticamente modificado da linha celular humana HeLa, proveniente de um carcinoma cervical, concebido para expressar de forma estável uma proteína EB3 marcada com GFP (e...
Personalização / Recomendações
- HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24Cell line€800.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A HeLa EB3-GFP Kirc 14 é um derivado geneticamente modificado da linha celular humana HeLa de carcinoma cervical, concebida para expressar de forma estável uma construção de fusão de EB3 (proteína de ligação terminal 3) marcada com GFP, com «Kirc 14» a designar um subclone específico (clone 14) selecionado do conjunto de células transfectadas. A EB3 é um membro da família das proteínas de ligação às extremidades que acompanha as extremidades positivas dos microtúbulos em crescimento e serve como marcador do comportamento dinâmico dos microtúbulos em células vivas. A proteína de fusão GFP-EB3 produz sinais fluorescentes característicos, semelhantes a cometas, nas pontas dos microtúbulos em polimerização, permitindo a obtenção de imagens em tempo real da dinâmica dos microtúbulos, do transporte intracelular e da organização do citoesqueleto em células vivas.
O HeLa EB3-GFP Kirc 14 é utilizado na investigação em biologia celular para a obtenção de imagens em células vivas da dinâmica das extremidades positivas dos microtúbulos, estudos sobre a montagem do fuso mitótico e as interações entre o cinetocoro e os microtúbulos, investigações sobre o transporte intracelular de carga e avaliação de compostos que afetam a dinâmica da polimerização dos microtúbulos. A expressão subclonal estável de GFP-EB3 proporciona uma intensidade e um padrão de fluorescência consistentes ao longo das passagens, tornando o clone 14 adequado para ensaios de imagem quantitativa e triagem de alto rendimento de agentes que têm como alvo os microtúbulos.
- Tecido
- Colo do útero
- Doença
- Adenocarcinoma cervical (de origem HeLa); transfectado de forma estável com GFP-EB3 (reportero da extremidade positiva dos microtúbulos)
- Aplicações
- Imagiologia da dinâmica dos microtúbulos em células vivas; estudos do fuso mitótico; investigação sobre a interação entre o cinetocoro e os microtúbulos; transporte intracelular; triagem de fármacos direcionados aos microtúbulos
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Estatuto em matéria de OGM
- GMO-S1
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
- Tipo de célula
- Células epiteliais
- Tempo de duplicação
- cerca de 24 horas
04Identificadores
- Referência
- HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (número de catálogo da Cytion 305718)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
05Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase, 10 min., 37 °C
- Subcultura
- Retire o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS. Cubra com Accutase, incube à temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos, ressuspenda com meio, centrifugue a 300×g durante 3 minutos e transfira para frascos novos com meio de seleção.
- Rácio de divisão
- 1 a 5
- Densidade de sementeira
- 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Controlo de qualidade e criopreservação
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
07Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim