الانتقال إلى المحتوى
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24
الأنسجة
عنق الرحم
المرض
سرطان غدي عنق الرحم (خلفية HeLa)؛ تم إدخال الجينات فيه بشكل مستقر باستخدام GFP-EB3 (مؤشر الطرف الموجب للأنابيب الدقيقة)

المستندات

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24

Cell line · رقم المنتج 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 هو مشتق مُعدَّل وراثيًّا من سلالة خلايا سرطان عنق الرحم البشرية HeLa، وقد تم هندسته ليُعبِّر بشكل مستقر عن بروتين EB3 المُعلَّم بـ GFP (e...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

HeLa EB3-GFP Kirc 14 هو مشتق معدل وراثيًا من سلالة خلايا سرطان عنق الرحم البشرية HeLa، وقد تم هندسته ليُعبِّر بشكل مستقر عن تركيبة اندماجية لبروتين EB3 (البروتين المرتبط بالأطراف 3) المُعلَّمة بـ GFP، مع ويشير مصطلح «Kirc 14» إلى مستنسخ فرعي محدد (المستنسخ 14) تم اختياره من المجموعة التي خضعت لعملية التحويل الجيني. ويُعد EB3 أحد أعضاء عائلة البروتينات المرتبطة بالأطراف (end-binding protein)، والتي تتعقب الأطراف الموجبة للأنابيب الدقيقة النامية، وتُستخدم كمؤشر لسلوك الأنابيب الدقيقة الديناميكي في الخلايا الحية. ينتج البروتين المدمج GFP-EB3 إشارات فلورية مميزة تشبه المذنب عند أطراف الأنابيب الدقيقة المتبلمرة، مما يتيح التصوير المباشر للخلايا الحية لديناميكيات الأنابيب الدقيقة، والنقل داخل الخلايا، وتنظيم الهيكل الخلوي في الوقت الفعلي.

يُستخدم HeLa EB3-GFP Kirc 14 في أبحاث بيولوجيا الخلايا لتصوير ديناميكيات الأطراف الموجبة للأنابيب الدقيقة في الخلايا الحية، ودراسات تجميع المغزل الانقسامي والتفاعلات بين الكينيتوكور والأنابيب الدقيقة، واستكشاف نقل الحمولة داخل الخلايا، وتقييم المركبات التي تؤثر على ديناميكيات بلمرة الأنابيب الدقيقة. يوفر التعبير المستقر لـ GFP-EB3 في المستنسخ الفرعي كثافة ونمطًا متسقين للفلورة عبر المراحل المختلفة، مما يجعل المستنسخ 14 مناسبًا لاختبارات التصوير الكمي والفحص عالي الإنتاجية للعوامل التي تستهدف الأنابيب الدقيقة.

الأنسجة
عنق الرحم
المرض
سرطان غدي عنق الرحم (خلفية HeLa)؛ تم إدخال الجينات فيه بشكل مستقر باستخدام GFP-EB3 (مؤشر الطرف الموجب للأنابيب الدقيقة)
التطبيقات
التصوير الحي لديناميكيات الأنابيب الدقيقة في الخلايا الحية؛ دراسات المغزل الانقسامي؛ أبحاث التفاعل بين الكينيتوكور والأنابيب الدقيقة؛ النقل داخل الخلية؛ فحص الأدوية التي تستهدف الأنابيب الدقيقة

02التصنيف

كائن حي
إنسان
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
الخلايا الظهارية
زمن المضاعفة
حوالي 24 ساعة

04المعرّفات

المرجع
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305718)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاز، 10 دقائق، 37 درجة مئوية
إعادة الاستنبات
أزل الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها بمحلول PBS. غطّها بمحلول Accutase، ثم اتركها في الحاضنة عند درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق، وأعد تعليقها في الوسط، ثم قم بالطرد المركزي عند 300×g لمدة 3 دقائق، وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط الانتقاء.
نسبة التقسيم
من 1 إلى 5
كثافة البذر
من 1 إلى 3 × 10⁴ خلية/سم²
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل + 10% DMSO للحصول على صلاحية كافية بعد ذوبان الجليد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.