Pāriet uz saturu
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24
Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Dzemdes kakla adenokarcinoma (HeLa fons); stabili transfekta ar GFP-EB3 (mikrotubulu plus-gala reportera gēns)

Dokumenti

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24

Cell line · Preces numurs 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 ir ģenētiski modificēts cilvēka HeLa dzemdes kakla karcinomas šūnu līnijas atvasinājums, kas izveidots, lai stabili ekspresētu ar GFP marķētu EB3 (e...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HeLa EB3-GFP Kirc 14 ir ģenētiski modificēts cilvēka HeLa dzemdes kakla karcinomas šūnu līnijas atvasinājums, kas izveidots, lai stabili ekspresētu ar GFP marķētu EB3 (end-binding protein 3) fūzijas konstruktu, kur „Kirc 14” apzīmē konkrētu subklonu (klons 14), kas atlasīts no transfekcijas rezultātā iegūtā šūnu kopuma. EB3 pieder pie galotnes saistošo proteīnu ģimenes, kas seko augošo mikrotubulu plus-galotnēm un kalpo kā marķieris, kas atspoguļo dinamisko mikrotubulu uzvedību dzīvajās šūnās. GFP-EB3 fūzijas proteīns rada raksturīgus komētasveida fluorescences signālus polimerizējošo mikrotubulu galos, ļaujot reāllaikā veikt dzīvo šūnu attēlveidošanu, lai novērotu mikrotubulu dinamiku, intracelulāro transportu un citoskeleta organizāciju.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 tiek izmantots šūnu bioloģijas pētījumos, lai veiktu dzīvo šūnu attēlveidošanu mikrotubulu plus-galu dinamikas novērošanai, pētītu mitotiskā vārpstiņa veidošanos un kinetohoru-mikrotubulu mijiedarbību, izpētītu intracelulāro kravas transportu, kā arī novērtētu savienojumus, kas ietekmē mikrotubulu polimerizācijas dinamiku. Stabilā subklonālā GFP-EB3 ekspresija nodrošina vienmērīgu fluorescences intensitāti un raksturu visās pasāžās, tādējādi padarot 14. klonu piemērotu kvantitatīviem attēlveidošanas testiem un mikrotubulu mērķa vielu augstas caurlaidspējas skrīningam.

Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Dzemdes kakla adenokarcinoma (HeLa fons); stabili transfekta ar GFP-EB3 (mikrotubulu plus-gala reportera gēns)
Pieteikumi
dzīvo šūnu mikrotubulu dinamikas attēlveidošana; mitotiskā vārpstiņa pētījumi; kinetohoru un mikrotubulu mijiedarbības izpēte; intracelulārais transports; mikrotubulām mērķēto zāļu skrīnings

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūnas
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 24 stundas

04Identifikatori

Atsauce
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24 (Cytion kataloga numurs 305718)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase, 10 min., 37 °C
Pārstādīšana
No piekļāvušajām šūnām noņemiet veco barotni un noskalojiet ar PBS. Pārlejiet ar Accutase, inkubējiet istabas temperatūrā 8–10 minūtes, atkārtoti suspendējiet barotnē, centrifugējiet 300×g 3 minūtes un pārnesiet uz jaunām kolbām ar selekcijas barotni.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 5
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 × 10⁴ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.