Siirry sisältöön
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.9.24
Kudos
Kohdunkaula
Sairaus
Kohdunkaulan adenokarsinooma (HeLa-tausta); vakioitu GFP-EB3-transfektio (mikrotubulusten plus-pään merkkigeeni)

Asiakirjat

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.9.24

Cell line · Tuotenumero 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 on ihmisen HeLa-kohdunkaulasyöpäsolulinjan geneettisesti muunnettu johdannainen, joka on kehitetty ilmentämään vakaasti GFP-merkittyä EB3:a (e...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HeLa EB3-GFP Kirc 14 on ihmisen HeLa-kohdunkaulasyöpäsolulinjan geneettisesti muunnettu johdannainen, joka on suunniteltu ilmentämään vakaasti GFP-merkittyä EB3-fuusiokonstruktia (end-binding protein 3), jossa jossa ”Kirc 14” viittaa tiettyyn aliklooniin (klooni 14), joka on valittu transfektoidusta solupoolista. EB3 kuuluu end-binding-proteiinien perheeseen, joka seuraa kasvavien mikrotubulusten plus-päitä ja toimii indikaattorina mikrotubulusten dynaamiselle käyttäytymiselle elävissä soluissa. GFP-EB3-fuusioproteiini tuottaa tyypillisiä komeetan kaltaisia fluoresoivia signaaleja polymeroituvien mikrotubulusten kärjissä, mikä mahdollistaa mikrotubulusten dynamiikan, solunsisäisen kuljetuksen ja sytoskeletonin organisoitumisen reaaliaikaisen kuvantamisen elävissä soluissa.

HeLa EB3-GFP Kirc 14:ää käytetään solubiologian tutkimuksessa mikrotubulusten plus-päiden dynamiikan elävien solujen kuvantamiseen, mitotisen spindelin kokoonpanon ja kinetokoorin ja mikrotubulusten välisten vuorovaikutusten tutkimiseen, solunsisäisen rahdin kuljetuksen selvittämiseen sekä mikrotubulusten polymeroitumisdynamiikkaan vaikuttavien yhdisteiden arviointiin. Vakaa subklonaalinen GFP-EB3-ilmentyminen takaa yhdenmukaisen fluoresenssin voimakkuuden ja kuvion eri viljelykertojen välillä, minkä ansiosta klooni 14 soveltuu kvantitatiivisiin kuvantamismäärityksiin ja mikrotubuleihin kohdistuvien aineiden suurikapasiteettiseen seulontaan.

Kudos
Kohdunkaula
Sairaus
Kohdunkaulan adenokarsinooma (HeLa-tausta); vakioitu GFP-EB3-transfektio (mikrotubulusten plus-pään merkkigeeni)
Sovellukset
Elävien solujen mikrotubulusten dynamiikan kuvantaminen; mitootisen spindelin tutkimukset; kinetokoorin ja mikrotubulusten välisen vuorovaikutuksen tutkimus; solunsisäinen kuljetus; mikrotubuluksiin kohdistuvien lääkkeiden seulonta

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolut
Kaksinkertaistumisaika
noin 24 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.9.24 (Cytion-tuotenumero 305718)
NCBI-verotunnus
9606

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase, 10 min., 37 °C
Soluviljely
Poista vanha elatusaine kiinnittyneistä soluista ja huuhtele ne PBS:llä. Lisää Accutasea, inkuboi huoneenlämmössä 8–10 minuuttia, suspendoi solut uudelleen elatusaineeseen, sentrifugoi 300×g:n voimalla 3 minuuttia ja siirrä solut uusiin pulloihin, joissa on valintalaitteistoa sisältävää elatusainetta.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴ solua/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.