
- Kudos
- Kohdunkaula
- Sairaus
- Kohdunkaulan adenokarsinooma (HeLa-tausta); vakioitu GFP-EB3-transfektio (mikrotubulusten plus-pään merkkigeeni)
Asiakirjat
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.9.24
Cell line · Tuotenumero 305718
HeLa EB3-GFP Kirc 14 on ihmisen HeLa-kohdunkaulasyöpäsolulinjan geneettisesti muunnettu johdannainen, joka on kehitetty ilmentämään vakaasti GFP-merkittyä EB3:a (e...
Räätälöinti / Suositukset
- HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.9.24Cell line€800.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
HeLa EB3-GFP Kirc 14 on ihmisen HeLa-kohdunkaulasyöpäsolulinjan geneettisesti muunnettu johdannainen, joka on suunniteltu ilmentämään vakaasti GFP-merkittyä EB3-fuusiokonstruktia (end-binding protein 3), jossa jossa ”Kirc 14” viittaa tiettyyn aliklooniin (klooni 14), joka on valittu transfektoidusta solupoolista. EB3 kuuluu end-binding-proteiinien perheeseen, joka seuraa kasvavien mikrotubulusten plus-päitä ja toimii indikaattorina mikrotubulusten dynaamiselle käyttäytymiselle elävissä soluissa. GFP-EB3-fuusioproteiini tuottaa tyypillisiä komeetan kaltaisia fluoresoivia signaaleja polymeroituvien mikrotubulusten kärjissä, mikä mahdollistaa mikrotubulusten dynamiikan, solunsisäisen kuljetuksen ja sytoskeletonin organisoitumisen reaaliaikaisen kuvantamisen elävissä soluissa.
HeLa EB3-GFP Kirc 14:ää käytetään solubiologian tutkimuksessa mikrotubulusten plus-päiden dynamiikan elävien solujen kuvantamiseen, mitotisen spindelin kokoonpanon ja kinetokoorin ja mikrotubulusten välisten vuorovaikutusten tutkimiseen, solunsisäisen rahdin kuljetuksen selvittämiseen sekä mikrotubulusten polymeroitumisdynamiikkaan vaikuttavien yhdisteiden arviointiin. Vakaa subklonaalinen GFP-EB3-ilmentyminen takaa yhdenmukaisen fluoresenssin voimakkuuden ja kuvion eri viljelykertojen välillä, minkä ansiosta klooni 14 soveltuu kvantitatiivisiin kuvantamismäärityksiin ja mikrotubuleihin kohdistuvien aineiden suurikapasiteettiseen seulontaan.
- Kudos
- Kohdunkaula
- Sairaus
- Kohdunkaulan adenokarsinooma (HeLa-tausta); vakioitu GFP-EB3-transfektio (mikrotubulusten plus-pään merkkigeeni)
- Sovellukset
- Elävien solujen mikrotubulusten dynamiikan kuvantaminen; mitootisen spindelin tutkimukset; kinetokoorin ja mikrotubulusten välisen vuorovaikutuksen tutkimus; solunsisäinen kuljetus; mikrotubuluksiin kohdistuvien lääkkeiden seulonta
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- GMO-status
- GMO-S1
- GMO-statuksen tiedot
- GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Solutyyppi
- Epiteelisolut
- Kaksinkertaistumisaika
- noin 24 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.9.24 (Cytion-tuotenumero 305718)
- NCBI-verotunnus
- 9606
05Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase, 10 min., 37 °C
- Soluviljely
- Poista vanha elatusaine kiinnittyneistä soluista ja huuhtele ne PBS:llä. Lisää Accutasea, inkuboi huoneenlämmössä 8–10 minuuttia, suspendoi solut uudelleen elatusaineeseen, sentrifugoi 300×g:n voimalla 3 minuuttia ja siirrä solut uusiin pulloihin, joissa on valintalaitteistoa sisältävää elatusainetta.
- Jakosuhde
- 1–5
- Kylvötiheys
- 1–3 × 10⁴ solua/cm²
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
07Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä