Skip to content
HeLa EB3-GFP Kirc 14 09/27/24
Tissue
Cổ tử cung
Disease
Ung thư biểu mô tuyến cổ tử cung (có nguồn gốc từ tế bào HeLa); được chuyển gen ổn định với GFP-EB3 (chất chỉ thị đầu dương của vi ống)

Documents

HeLa EB3-GFP Kirc 14 09/27/24

Cell line · Product number 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 is a genetically modified derivative of the human HeLa cervical carcinoma cell line, engineered to stably express a GFP-tagged EB3 (e...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HeLa EB3-GFP Kirc 14 là một dòng tế bào biến đổi gen có nguồn gốc từ dòng tế bào ung thư cổ tử cung HeLa của người, được thiết kế để biểu hiện ổn định cấu trúc hợp nhất EB3 (protein liên kết đầu 3) được gắn thẻ GFP, với "Kirc 14" chỉ một dòng con cụ thể (dòng 14) được chọn lọc từ nhóm tế bào đã được chuyển gen. EB3 là một thành viên của họ protein liên kết đầu (end-binding protein), có chức năng theo dõi các đầu dương (+) của vi ống đang phát triển và đóng vai trò như một chỉ thị cho hành vi động học của vi ống trong tế bào sống. Protein hợp nhất GFP-EB3 tạo ra các tín hiệu huỳnh quang đặc trưng hình sao chổi tại các đầu của vi ống đang polymer hóa, cho phép quan sát hình ảnh tế bào sống về động học vi ống, vận chuyển nội bào và tổ chức cytoskeleton theo thời gian thực.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 được sử dụng trong nghiên cứu sinh học tế bào để quan sát động học đầu dương của vi ống trên tế bào sống, nghiên cứu quá trình lắp ráp trục phân bào và tương tác giữa kinetochore với vi ống, điều tra quá trình vận chuyển hàng hóa nội bào, cũng như đánh giá các hợp chất ảnh hưởng đến động học quá trình polymer hóa vi ống. Sự biểu hiện ổn định của dòng phụ GFP-EB3 đảm bảo cường độ và mẫu phát quang nhất quán qua các thế hệ nuôi cấy, khiến dòng 14 phù hợp cho các thử nghiệm hình ảnh định lượng và sàng lọc quy mô lớn các tác nhân nhắm mục tiêu vào vi ống.

Tissue
Cổ tử cung
Disease
Ung thư biểu mô tuyến cổ tử cung (có nguồn gốc từ tế bào HeLa); được chuyển gen ổn định với GFP-EB3 (chất chỉ thị đầu dương của vi ống)
Applications
Quay phim động học vi ống trong tế bào sống; nghiên cứu trục phân bào; nghiên cứu tương tác giữa kinetochore và vi ống; vận chuyển nội bào; sàng lọc thuốc nhắm mục tiêu vào vi ống

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Cell type
Tế bào biểu mô
Doubling time
khoảng 24 giờ

04Identifiers

Citation
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (Mã sản phẩm Cytion 305718)
NCBI TaxID
9606

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase, 10 phút, 37°C
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa bằng PBS. Phủ Accutase lên, ủ ở nhiệt độ phòng trong 8–10 phút, tái huyền phù bằng môi trường nuôi cấy, ly tâm ở 300×g trong 3 phút, rồi chuyển sang các bình nuôi cấy mới chứa môi trường chọn lọc.
Split ratio
1 đến 5
Seeding density
1 đến 3 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Với tư cách là môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sót sau khi rã đông.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.