Skip to content
HeLa EB3-GFP Kirc 14 09/27/24
Tissue
ปากมดลูก
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองของปากมดลูก (พื้นหลัง HeLa); ที่ได้รับการถ่ายโอนยีน GFP-EB3 (ตัวรายงานปลายบวกของไมโครทูบูล) อย่างคงที่

Documents

HeLa EB3-GFP Kirc 14 09/27/24

Cell line · Product number 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 is a genetically modified derivative of the human HeLa cervical carcinoma cell line, engineered to stably express a GFP-tagged EB3 (e...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HeLa EB3-GFP Kirc 14 เป็นสายพันธุ์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมจากสายเซลล์มะเร็งปากมดลูก HeLa ของมนุษย์ ซึ่งได้รับการออกแบบให้แสดงออกอย่างเสถียรของโครงสร้างฟิวชัน EB3 (end-binding protein 3) ที่ติดแท็ก GFP โดย "Kirc 14" หมายถึงซับโคลนเฉพาะ (โคลน 14) ที่ถูกคัดเลือกจากกลุ่มเซลล์ที่ผ่านการทรานส์เฟกต์ EB3 เป็นสมาชิกของตระกูลโปรตีนเอนด์-ไบนดิ้ง ซึ่งติดตามปลายบวกของไมโครทูบูลที่กำลังเติบโต และทำหน้าที่เป็นตัวบ่งชี้พฤติกรรมไดนามิกของไมโครทูบูลในเซลล์ที่มีชีวิต โปรตีนฟิวชัน GFP-EB3 สร้างสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ลักษณะคล้ายดาวหางที่ปลายไมโครทูบูลที่กำลังเกิดพอลิเมอไรเซชัน ทำให้สามารถถ่ายภาพเซลล์มีชีวิตเพื่อศึกษาพลวัตของไมโครทูบูล การขนส่งภายในเซลล์ และการจัดระเบียบโครงร่างเซลล์แบบเรียลไทม์ได้

HeLa EB3-GFP Kirc 14 ถูกใช้ในวิจัยชีววิทยาเซลล์เพื่อถ่ายภาพเซลล์สดของพลวัตปลายบวกไมโครทูบูล การศึกษาการประกอบสปินเดิลไมโทติกและปฏิสัมพันธ์ระหว่างคิเนโตโครกับไมโครทูบูล การวิจัยการขนส่งสินค้าภายในเซลล์ และการประเมินสารประกอบที่ส่งผลต่อพลวัตการโพลีเมอไรเซชันของไมโครทูบูล การแสดงออกของ GFP-EB3 ในซับโคลนที่เสถียรให้ระดับความเข้มและรูปแบบการเรืองแสงที่สม่ำเสมอในทุกการเพาะเลี้ยง ทำให้โคลน 14 เหมาะสำหรับการวิเคราะห์ภาพเชิงปริมาณและการคัดกรองแบบผ่านปริมาณสูงของสารที่มุ่งเป้าไปที่ไมโครทูบูล

Tissue
ปากมดลูก
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองของปากมดลูก (พื้นหลัง HeLa); ที่ได้รับการถ่ายโอนยีน GFP-EB3 (ตัวรายงานปลายบวกของไมโครทูบูล) อย่างคงที่
Applications
การถ่ายภาพพลวัตของไมโครทูบูลในเซลล์มีชีวิต; การศึกษาแกนไมโทติก; การวิจัยปฏิสัมพันธ์ระหว่างคิเนโทคอร์และไมโครทูบูล; การขนส่งภายในเซลล์; การคัดกรองยาที่มุ่งเป้าไปที่ไมโครทูบูล

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิว
Doubling time
ประมาณ 24 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305718)
NCBI TaxID
9606

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
Accutase, 10 นาที, 37°C
Subculturing
นำสื่อเลี้ยงเก่าออกจากเซลล์ที่ติดอยู่บนพื้นผิว แล้วล้างด้วย PBS ราด Accutase ลงบนเซลล์ ปล่อยให้บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาที ผสมให้เซลล์แขวนตัวในสื่อเลี้ยงใหม่ ปั่นเหวี่ยงที่ 300×g เป็นเวลา 3 นาที แล้วถ่ายเซลล์ไปยังขวดใหม่ที่มีสื่อเลี้ยงสำหรับการคัดเลือก
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
1 ถึง 3 × 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Quality control and cryopreservation

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า