Preskoči na vsebino
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27. 9. 24
Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
Adenokarcinom materničnega vratu (izvor HeLa); stabilno transfektiran z GFP-EB3 (reporter za plus-konec mikrotubulov)

Dokumenti

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27. 9. 24

Cell line · Številka izdelka 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 je gensko spremenjena različica človeške celične linije HeLa, ki izvira iz karcinoma materničnega vratu, in je bila zasnovana tako, da stabilno izraža EB3, označen z GFP (e...

€800.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

HeLa EB3-GFP Kirc 14 je gensko spremenjena različica človeške celične linije HeLa, ki izvira iz karcinoma materničnega vratu, in je bila zasnovana za stabilno izražanje fuzijskega konstrukta EB3 (end-binding protein 3), označenega z GFP, pri čemer »Kirc 14« označuje specifičen podklon (klon 14), izbran iz transfektiranega sklopa. EB3 spada v družino end-binding proteinov, ki sledijo rastočim plus-koncem mikrotubulov in služijo kot indikator dinamičnega obnašanja mikrotubulov v živih celicah. Fuzijski protein GFP-EB3 ustvarja značilne kometu podobne fluorescenčne signale na konicah polimerizirajočih mikrotubulov, kar omogoča slikanje dinamike mikrotubulov, intracelularnega transporta in organizacije citoскеletov v živih celicah v realnem času.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 se uporablja v raziskavah celične biologije za slikanje dinamike plus-koncev mikrotubulov v živih celicah, študije sestavljanja mitotičnega vretena in interakcij med kinetokori in mikrotubuli, preiskave intracelularnega transporta tovora ter ocenjevanje spojin, ki vplivajo na dinamiko polimerizacije mikrotubulov. Stabilna subklonska ekspresija GFP-EB3 zagotavlja dosledno intenzivnost in vzorec fluorescenca skozi vse pasáže, zaradi česar je klon 14 primeren za kvantitativne slikanjske teste in presejanje z visoko zmogljivostjo sredstev, usmerjenih v mikrotubule.

Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
Adenokarcinom materničnega vratu (izvor HeLa); stabilno transfektiran z GFP-EB3 (reporter za plus-konec mikrotubulov)
Uporaba
Slikanje dinamike mikrotubulov v živih celicah; raziskave mitotičnega vretena; raziskave interakcij med kinetokori in mikrotubuli; intracelularni transport; presejanje zdravil, usmerjenih v mikrotubule

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Epitelijske celice
Čas podvojitve
približno 24 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27. 9. 24 (kataloška številka Cytion 305718)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase, 10 min., 37 °C
Preusmeritev v drugo kulturo
Staro gojišče odstranite s prirastlih celic in jih sperite s PBS. Prekrijte z Accutasejem, inkubirajte pri sobni temperaturi 8–10 minut, ponovno suspendirajte v gojišču, centrifugirajte pri 300×g 3 minute in prenesite v čiste kolbe s selekcijskim gojiščem.
Razmerje delitve
1 do 5
Gostota setve
1 do 3 × 10⁴ celic/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.