Gå til innholdet
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24
Vev
Livmorhalsen
Sykdom
Adenokarsinom i livmorhalsen (HeLa-bakgrunn); stabilt transfisert med GFP-EB3 (reporter for mikrotubulers pluss-ende)

Dokumenter

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24

Cell line · Produktnummer 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 er et genetisk modifisert avledet av den humane HeLa-cellelinjen for livmorhalskreft, utviklet for å uttrykke et GFP-merket EB3 på en stabil måte (e...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HeLa EB3-GFP Kirc 14 er et genetisk modifisert avledet av den humane HeLa-cellelinjen for livmorhalskreft, utviklet for å uttrykke et GFP-merket EB3-fusjonskonstrukt (end-binding protein 3) på en stabil måte, med «Kirc 14» betegner en spesifikk subklon (klon 14) valgt ut fra den transfekterte puljen. EB3 tilhører familien av endebindende proteiner som sporer de voksende pluss-endene av mikrotubuli og fungerer som en indikator for dynamisk mikrotubuli-atferd i levende celler. GFP-EB3-fusjonsproteinet produserer karakteristiske kometlignende fluorescerende signaler ved spissene av polymeriserende mikrotubuli, noe som muliggjør avbildning av mikrotubulidynamikk, intracellulær transport og cytoskelettets organisering i levende celler i sanntid.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 brukes i cellebiologisk forskning til avbildning av mikrotubuli-pluss-ende-dynamikk i levende celler, studier av mitotisk spindelmontering og kinetokor-mikrotubuli-interaksjoner, undersøkelser av intracellulær lasttransport og evaluering av forbindelser som påvirker mikrotubuli-polymerisasjonsdynamikken. Det stabile subklonale GFP-EB3-uttrykket gir jevn fluorescensintensitet og -mønster gjennom flere passasjer, noe som gjør klon 14 egnet for kvantitative avbildningsanalyser og høykapasitetsscreening av midler rettet mot mikrotubuli.

Vev
Livmorhalsen
Sykdom
Adenokarsinom i livmorhalsen (HeLa-bakgrunn); stabilt transfisert med GFP-EB3 (reporter for mikrotubulers pluss-ende)
Søknader
Avbildning av mikrotubulidynamikk i levende celler; studier av mitotisk spindel; forskning på interaksjonen mellom kinetokorer og mikrotubuli; intracellulær transport; screening av legemidler rettet mot mikrotubuli

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelceller
Fordoblingstid
ca. 24 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24 (Cytion-katalognummer 305718)
NCBI-skattenummer
9606

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase, 10 min., 37 °C
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de vedheftede cellene og vask med PBS. Tilsett Accutase, inkuber ved romtemperatur i 8–10 minutter, resuspender med medium, sentrifuger ved 300×g i 3 minutter, og overfør til nye kolber med seleksjonsmedium.
Oppdelingsforhold
1 til 5
Såtetthet
1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.