Премини към съдържанието
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24
Тъкан
Цервикс
Заболяване
Аденокарцином на шийката на матката (на фона на HeLa); стабилно трансфектиран с GFP-EB3 (репортер за плюс-края на микротубулите)

Документи

HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24

Cell line · Номер на продукта 305718

HeLa EB3-GFP Kirc 14 е генетично модифициран вариант на човешката клетъчна линия HeLa от карцином на шийката на матката, създаден така, че да експресира стабилно EB3, маркиран с GFP (e...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

HeLa EB3-GFP Kirc 14 е генетично модифициран дериват на човешката клетъчна линия HeLa за карцином на шийката на матката, създаден да експресира стабилно фузионен конструкт на EB3 (енд-свързващ протеин 3), маркиран с GFP, като „Kirc 14“ обозначава специфичен подклон (клон 14), избран от трансфектирания пул. EB3 е член на семейството на енд-свързващите протеини, който проследява растящите плюс-краища на микротубулите и служи като репортер за динамичното поведение на микротубулите в живите клетки. Фузионният протеин GFP-EB3 генерира характерни флуоресцентни сигнали, наподобяващи комети, на върховете на полимеризиращите се микротубули, което позволява визуализация на динамиката на микротубулите, вътреклетъчния транспорт и организацията на цитоскелета в живи клетки в реално време.

HeLa EB3-GFP Kirc 14 се използва в изследванията по клетъчна биология за визуализация на динамиката на плюс-краищата на микротубулите в живи клетки, проучвания на сглобяването на митотичния шпиндел и взаимодействията между кинетохорите и микротубулите, изследвания на вътреклетъчния транспорт на товари, както и за оценка на съединения, които влияят върху динамиката на полимеризацията на микротубулите. Стабилната субклонална експресия на GFP-EB3 осигурява постоянна интензивност и модел на флуоресценцията при всички пасажи, което прави клон 14 подходящ за количествени визуализационни тестове и скрининг с висока производителност на агенти, насочени към микротубулите.

Тъкан
Цервикс
Заболяване
Аденокарцином на шийката на матката (на фона на HeLa); стабилно трансфектиран с GFP-EB3 (репортер за плюс-края на микротубулите)
Приложения
Визуализация на динамиката на микротубулите в живи клетки; изследвания на митотичния шпиндел; изследвания на взаимодействието между кинетохорите и микротубулите; вътреклетъчен транспорт; скрининг на лекарства, насочени към микротубулите

02Класификация

Организъм
Човек
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This HeLa EB3 GFP KIRC14 line contains a GFP-tagged EB3 construct for microtubule plus-end tracking in live-cell imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителни клетки
Време за удвояване
около 24 часа

04Идентификатори

Източник
HeLa EB3-GFP Kirc 14 27.09.24 (каталожен номер на Cytion 305718)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase, 10 мин., 37 °C
Пресаждане
Отстранете старата среда от прилепналите клетки и ги измийте с PBS. Покрийте с Accutase, инкубирайте при стайна температура в продължение на 8–10 минути, ресуспендирайте със среда, центрофугирайте при 300×g в продължение на 3 минути и прехвърлете в чисти колби със селекционна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 5
Плътност на засяването
от 1 до 3 × 10⁴ клетки/см²
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Контрол на качеството и криоконсервация

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна хранителна среда + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.